桂芍知母汤对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠炎性因子的影响

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目的:通过观察桂芍知母汤不同剂量对Ⅱ型胶原诱导关节炎大鼠(collagen-induced arthritis CIA)形态学、炎性因子等指标的影响,探讨桂芍知母汤对CIA大鼠急性期关节炎性反应的疗效及作用机制。方法:1、分组及造模:将80只清洁级Wistar大鼠先饲以普通饲料一周后,随机分为正常组,模型组、桂芍知母汤高剂量组、桂芍知母汤中剂量组、桂芍知母汤低剂量组及雷公藤多苷片组,分组后,模型组和各用药组大鼠在其左后足跖皮内处按每只大鼠0.1ml的剂量注射混合乳剂,正常组大鼠左后足跖皮内处按每只大鼠0.1ml的剂量注射生理盐水,初次免疫7天后再次加强免疫,在大鼠左足跖皮内处再次注射0.1ml混合乳剂,尽量避免与初次免疫注射相同位置。各组大鼠再次免疫后,饲养7日,从除正常组以外其他5组中随机抽取3只形态学观察呈阳性表现,提示造模成功。2、药物干预:造模成功后,每天对各用药组大鼠以灌胃方式分别给予药物干预(根据体重按5ml/kg),同时正常组和模型组大鼠则给予的生理盐水灌胃(根据体重按5ml/kg)。在给药28天时每组随机抽取10只处死后取材。3、一般形态学观察:初次免疫后第14及药物干预28天对大鼠左后肢足肿胀体积及除造模足其它三足关节炎指数各测量一次,并记录大鼠生长情况变化。4、实验指标检测:取材当天根据体重按3ml/kg对各组大鼠给予腹腔注射25%乌拉坦麻醉,大鼠麻醉后,将各组大鼠腹腔剖开,于腹主动脉取血1ml*4,立即离心(3600r/min,10min),分离血清,分装后予-70℃密封保存,以备做坏死肿瘤因子-α、白细胞介素-1β、基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9水平指标检测。取材当天腹主动脉取血后,将膝关节的皮毛、肌肉、肌腱组织剥离、充分暴露关节,于膝关节滑膜及其周围组织处同一部位取材,置于10%甲醛溶液中固定后,再将组织浸入8%的甲酸脱钙2周,备做光镜检测。结果:1、桂芍知母汤可明显降低CIA大鼠血清中的坏死肿瘤因子-α、白细胞介素-1β水平;2、桂芍知母汤可明显降低CIA大鼠血清中的基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9水平;结论:桂芍知母汤可以通过降低CIA大鼠的坏死肿瘤因子-α、白细胞介素-1β水平、同时抑制基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9的表达,以起到缓解滑膜细胞的过度增生,阻止炎性细胞浸润和巨噬A型细胞增生,进而起到抗炎止痛,改善关节微循环,调节免疫等作用,从而达到防治风湿性关节炎的目的。
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