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试验以9 个酿酒葡萄品种、1 个鲜食葡萄品种和1 个砧木葡萄品种的胚珠外植体为试材,研究了外源激素配比、基本培养基、基因型、胚龄对葡萄愈伤组织产生的影响;试验了培养条件、碳源、添加物、活性炭浓度对葡萄胚状体产生的影响;以及不同基本培养基对葡萄胚状体萌发及再生植株的影响;还对葡萄胚性愈伤组织的最适保存培养基和保存条件以及胚状体的干化处理等进行了研究。试验结果如下: 1 通过多因子正交设计试验,筛选出葡萄胚珠愈伤组织的最佳诱导培养基为NN-1969+0.5mg/L 2,4-D+1.5mg/L 6-BA(NN3)。基本培养基筛选结果表明,NN-1969 培养基较MS、B5培养基更适合葡萄胚珠愈伤组织诱导。基因型对愈伤组织诱导影响很大,尽管研究的11 个品种都有愈伤组织产生,但愈伤组织形态和数量有较大差异,其中黑比诺、梅鹿特、赤霞珠、品丽珠、黑佳美和神索6 个品种的胚珠产生了胚性愈伤组织,但诱导率有显著差异,最高是神索为7.5%,最低是黑佳美为2.08%。葡萄胚珠在花后8-10 周愈伤组织发生率最高,可达75%以上。 2 胚性愈伤组织增殖研究中,平均生长量和平均增殖倍数都是液体培养基>固体培养基>浅层培养基,液体培养基的平均生长量为0.3236g,平均增殖倍数为7.01,因此液体培养基NN3 在增殖过程中是可选的。 3 对葡萄胚状体诱导的条件进行研究发现,以NN-1969+0.5mg/L 6 -BA+0.03mg/L NAA(NN2)为分化培养基,黑暗培养时间为光照培养时间的2 倍,效果理想。在NN2 培养基上添加不同浓度的蔗糖、白砂糖、葡萄糖和麦芽糖;不同浓度的CH 和LH;不同浓度的AC;结果表明,葡萄体胚诱导的最适碳源为蔗糖,最佳浓度为30g/L,胚状体诱导率可达到56.8%;添加物CH 和LH 的最佳浓度均为0.3g/L,胚状体诱导率均达到了50%以上;AC 浓度1.5-3g/L,胚状体诱导效果较好。 4 葡萄体胚诱导成苗的最适培养基为GS+0.2mg/L IAA+0.015g/L 青霉素,萌发率为52.5%,成苗率为33.4%,生根率为69.8%。 5 葡萄胚性愈伤组织在NN3 固体培养基上保存4 个月左右,转到NN2 固体培养基上培养20d,然后再挑选优质的胚性愈伤组织转到NN3 上保存,如此反复,间隔保存,有利于胚性愈