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本研究应用改良的TRAP—银染法检测了多种人类良、恶性肿瘤和血液病患者的端粒酶活性,试图从分子水平揭示肿瘤的发生机制及端粒酶在肿瘤发生发展中的作用,探讨端粒酶活性检测对于肿瘤的早期诊断、鉴别诊断以及对疗效预后评价的意义,分析端粒酶作为良好的肿瘤检测指标的可能;并以此为基础分析和探讨以端粒酶为靶点治疗肿瘤的途径。 本研究检测了226例不同组织(包括147例恶性肿瘤组织、79例良性及癌旁正常组织)的端粒酶活性,对96例血液病及51例胸腔积液的端粒酶活性进行了研究分析。比较分析了端粒酶活性与肿瘤生物学行为及临床资料的相关性;对比研究了化疗前后的乳腺癌端粒酶活性表达情况。此方法简便实用,对肿瘤诊断的灵敏度83%,特异性88.6%,阳性准确率达96.8%,足以满足临床标本的检测要求,为医生和肿瘤患者提供诊断治疗的依据。 结果表明:1)恶性肿瘤组织147例中122例端粒酶表达呈阳性,其中肺癌端粒酶活性阳性率86.84%,食管癌94.74%,肾癌88.88%,乳腺癌和直肠癌分别为72.13%和87.50%,甲状腺瘤、黑色素瘤及宫颈癌组织端粒酶活性均呈阳性表达。35例癌旁正常组织端粒酶活性表达阳性率11.43%(4/35),非恶性肿瘤组织阳性率11.37%(5/44)。63例白血病端粒酶活性表达51例阳性(80.95%),其他33例血液病端粒酶活性阳性率仅15.15%。2)伴淋巴结转移的恶性肿瘤组织的端粒酶活性(95.83%)与淋巴结未转移组(86.67%)无显著性差异。我们注意到69例男性及78例女性肿瘤病人的端粒酶活性表达阳性率分别为82.61%和83.33%,差别无显著性。3)乳腺癌化疗前端粒酶活性阳性率94.12%(32/34),化疗后仅为44.44%,差别有显著性意义。4)恶性胸水的端粒酶活性表达阳性率为80.00%,且比传统细胞学检查灵敏度高,而非恶性胸腔积液阳性率仅为8.33%(3/36),两者间存在极显著性差异。 以上结果表明:1)恶性肿瘤组织端粒酶活性明显高于良性肿瘤及癌旁组织(P<0.01),而良性肿瘤与正常组织无明显差别(P>0.05);肺癌、食管癌、乳腺纂硕士学位论文入IA凡T〔R’5 Tfl[515癌、甲状腺瘤,黑色素瘤、宫颈癌、直肠癌及肾癌均有很高的端粒酶检出率和活性:白血病细胞也显示了高于正常白细胞的端粒酶活性(P<0.01)。结果显示端粒酶活性与恶性肿瘤密切相关,且这种相关性有较好的特异性和广谱性;对恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断有着重要的参考价值。2)本研究表明端粒酶活性与肿瘤病人的年龄、性别及肿瘤的部位、淋巴结转移情况无相关性:提示端粒酶的激活持续存在于肿瘤的全过程,端粒酶活性可以作为肿瘤早期诊断及预测肿瘤复发的标志物。3)由于胸腔积液等脱落细胞学检查检出率较低,胸腔积液的诊断及鉴别分类比较困难;而端粒酶活性检测有较高的特异性与灵敏性,可作为一个胸腔积液鉴别诊断方法和筛查指标。4)化疗药物对细胞端粒酶活性的影响可以作为化疗敏感性指标以指导临床用药;化疗前后的端粒酶活性的差别可用来评价疗效及预后。进一步提示通过抑制端粒酶活性表达以治疗癌症的可能。