论文部分内容阅读
本文选取尖吻鲈（Lates calcarifer,Bloch）作研究对象,探讨了其早期发育过程中异速生长现象及多种环境胁迫因子对其抗氧化、消化的影响,初步研究了尖吻鲈早期器官发育规律及环境胁迫下体内抗氧化、消化指标的变化,以期为尖吻鲈早期苗种繁育提供参考。自孵化后第1日龄起,每日从桶内定时随机抽取10个尖吻鲈样本,使用Auto CAD2014软件测量躯干、尾部、头部的各指标,用数学模型y=aebx来拟合全长和日龄的函数关系,利用幂函数方程y=axb模拟异速生长模型,把16日龄作为仔、稚鱼的区分节点。结果表明,仔、稚鱼阶段中,重要器官在短时间形成分化过程中,均表现生长异速。吻长与口宽于仔、稚鱼期为生长速率不同的正异速生长;眼径在仔鱼阶段是等速生长,稚鱼阶段是负异速生长;头高在仔鱼阶段是正异速生长,稚鱼阶段发育至负异速生长。在躯干部分器官中,头长在仔、稚鱼阶段均为快速生长,体高及肛前长相对体长全长而言为等速生长。游泳器官内,仔鱼阶段胸鳍维持等速生长,稚鱼阶段发育至正异速生长;仔鱼阶段尾鳍维持负异速生长,稚鱼阶段发育至等速生长,而稚鱼阶段分化的臀鳍、背鳍与腹鳍实现快速发育。这些对于尖吻鲈早期生存至关重要的器官的快速发育,使孵化后接受外源性营养的尖吻鲈鱼产生的代谢损耗降到最低,能明显升高生存能力,早日适应外界复杂环境。采用软骨-硬骨分染技术,研究了尖吻鲈（1-23日龄）脊柱及胸鳍、腹鳍、臀鳍等的主要形态发育特征。在3日龄时脊柱出现弯曲,胸鳍、尾鳍原基逐渐形成;5日龄脊柱末端出现上翘,背鳍发育开始;9日龄时,出现脊索,开始形成髓弓、脉弓;尾杆骨出现上翘,随之尾鳍形成;胸鳍原基与背鳍鳍皱开始出现,臀鳍发育开始;至13日龄,胸鳍与尾鳍基本完成发育,而髓棘与脉棘开始出现;16日龄时,腹鳍开始发育,背肋和腹肋也随着出现,尾杆骨收缩,背鳍和胸鳍进入发育后期;脊柱19日龄表现出硬骨化,胸鳍发育出鳍棘,附肢骨骼接近完全发育;背肋与腹肋21日龄时逐渐变硬骨,尾鳍的骨化此时基本完成,而髓棘、髓弓开始出现硬骨,脉弓与脉棘开始出现硬骨;23日龄脊柱骨化完全,胸鳍发育完成,鱼体骨骼基础框架完成发育,鳍条骨化、分节,完成变态。骨骼发育畸形在孵化后10天开始出现,在孵化后20-22天畸形率较高。脊柱与附肢骨的发育次序规律同其它鱼类差不多一致,发育节点却不同;其骨骼畸形发育首次在孵化后10天左右,多数集中在孵化后20-22天。本试验采用96h半静水毒性试验法,设定实验用液的浓度为0mg/L、5mg/L、10mg/L、15mg/L、20mg/L共5组,各组有3个平行,每个容器（50L）内投放120尾17日龄的健康尖吻鲈稚鱼,在24h、48h、72h及96h共4个时间点分别从各容实验器内取样5尾。测定各消化酶、各抗氧化酶活性与蛋白。结果显示24h下,随氨氮浓度升高,SOD酶活力呈先升后降的趋势,且由于胁迫时间增多,高浓度氨氮刺激下SOD活性下降。氨氮胁迫下CAT活力表现为先升后降,与SOD活力的变化趋势相似。24h-96hGSH-Px活性随着氨氮浓度提高呈现先升后降趋势,20mg/L组GSH-Px活性较对照组显著低,与SOD、CAT的活性变化规律相似。此外,氨氮抑制POD活性,POD为先降后升的趋势。氨氮胁迫初期,酸性磷酸酶呈现先升后降的趋势,后期出现逐渐升高的趋势。由于氨氮浓度的增大,脂肪酶、胰蛋白酶与淀粉酶出现先升后降的趋势,短时间内消化酶活力增大,提升了消化与吸收能力,补偿因胁迫消耗的能量,而一旦持续超过一定范围,高氨氮浓度便会抑制消化酶的活性。从对亚硝酸盐耐受与存活比例上看,具有较强的抗性。胁迫剂量与时间均对各抗氧化酶及消化酶活性影响显著。实验结束时SOD活力较对照高;而除最高组外POD活性,均较对照显著性低;最高浓度处理组、300mg/L、500mg/L处理组CAT活性较对照组显著高,而其他处理组均比对照组显著低;400mg/L组ACP活性较对照组高以外,其他组较对照组低或略低。早期胁迫下,各组脂肪酶波动较大,实验终止时,低浓度组脂肪酶活性与对照组无异,随着浓度升高,随即出现上升又下降再上升的趋势,推测与所选试验浓度和个体差异性有关。本实验中,采用5个温度梯度,20℃、22℃、24℃、26℃、28℃,其中28℃作为对照组。低温胁迫显著提升SOD活力,POD活力在低温刺激初期较低,随时间延长升至较高水平。低温刺激下CAT活性较对照组显著高。GSH-Px活性显著升高,后逐渐恢复至对照组水平。ACP活性在低温时显著升高。而脂肪酶活性降低后稍微回升。淀粉酶、胰蛋白酶与胃蛋白酶活性随温度的降低显著升高。低温明显影响尖吻鲈稚鱼抗氧化酶与消化酶活性,且短时间内尖吻鲈稚鱼对低温环境表现出一定的耐受性。