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目的:检测PD-1、PD-L1在HCC组织中的表达和HCC组织中CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的浸润程度,探讨PD-1、PD-L1和CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞与HCC患者预后的关系。方法:收集2011年1月至2013年6月在广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科首次行肝切除术治疗的106例HCC患者的冰冻标本组织和196例HCC患者的癌和癌旁病理组织蜡块,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western-Blotting,WB)技术和免疫组化技术,在mRNA和蛋白质水平检测PD-1、PD-L1在HCC组织中的表达和HCC组织中CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的浸润程度。收集符合蜡块部分纳入标准的196例HCC患者资料,分析PD-1、PD-L1在HCC组织中的表达水平和HCC组织中CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞浸润程度与HCC患者预后的关系。结果:q RT-PCR、WB和免疫组化结果显示,癌组织中PD-1、PD-L1的mRNA和蛋白水平均显著高于癌旁组织(P<0.001)。PD-1或PD-L1高表达与多个不良临床病理因素有关:如多结节、Edmondson-Steiner分级III/IV级和BCLC C期肿瘤。在总生存率方面,PD-1高表达组患者总生存率显著低于低表达组患者(P=0.048),但两组患者在无瘤生存率方面无统计学差异(P=0.118)。PD-L1高表达组患者总生存率显著低于低表达组患者(P=0.015),但两组患者在无瘤生存率方面也无统计学差异(P=0.481)。CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞高表达与多个临床病理因素相关,如与肿瘤大小、肿瘤个数、术前血清白蛋白和Edmondson-Steiner分级III/IV级相关。CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞高浸润组患者与低浸润组患者在总生存率和无瘤生存率方面均无统计学差异(P=0.103;P=0.135)。对总样本的多因素分析显示,肿瘤直径≥5cm、多结节、微血管侵犯、包膜不完整、术前甲胎蛋白≥400 ng/ml、术后1月甲胎蛋白≥400 ng/ml、Edmondson-Steiner分级III/IV、BCLC C期肿瘤、肿瘤复发和PD-1、PD-L1、CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞高表达是患者死亡的独立危险因素。在无瘤生存率方面,肿瘤直径≥5cm、多结节、微血管侵犯、包膜不完整、术前甲胎蛋白≥400 ng/ml、术后1月甲胎蛋白≥400 ng/ml、BCLC C期肿瘤是肿瘤复发的独立危险因素结论:HCC癌组织中PD-1、PD-L1的表达高于癌旁,PD-1、PD-L1在HCC组织中的表达和HCC组织中CD4~+CD25~+调节性T淋巴细胞的浸润程度与多个临床病理因素相关,是预后不良的风险因素。