糖尿病是全球性疾病，已经成为仅次于心脑血管疾病、癌症的第三致死性疾病，其中，Ⅰ型糖尿病是一种自身免疫性疾病，主要表现为单核细胞浸润胰岛（胰岛炎）和β细胞的选择性破坏。而β细胞的破坏机制一直是研究Ⅰ型糖尿病发生、发展的关键。 β细胞的破坏是一个复杂并且机制未明的分子事件，细胞因子（如IL-1β）可能起着关键作用。在IL-1β作用下，β细胞伴随许多基因的特异性改变，这些改变从基因水平反映了β细胞的破坏机理。因此，若能全面分离与IL-1 β对胰岛β细胞选择性毒性有关的基因并能了解这些基因的功能，对于探索Ⅰ型糖尿病的分子发病机理及寻找Ⅰ型糖尿病的预防和治疗药物将具有重要意义。 目的：分离IL-1 β作用后胰岛β细胞系—NIT-1细胞的差异表达基因，并对其进行分析和鉴定。以期在基因水平上了解β细胞的破坏机制并为筛选预防和治疗Ⅰ型糖尿病的药物寻找靶标。 方法：采用转基因NOD小鼠来源的胰岛β细胞系—NIT-1细胞作为细胞模型；用不同浓度的IL-1β刺激，通过测定不同浓度IL-1β作用下，NIT-1细胞胰岛素的分泌情况制定合适的刺激浓度；通过RD-PCR技术分离差异表达基因，并对差异表达片段进行克隆，转化JM109大肠杆菌；用RNase保护分析鉴定阳性克隆，通过质粒提取，对阳性克隆进行测序，并提交GeneBank进行同源性对比分析。第一军医大学博士研究生论文 结果:实验选用50U/ml的IL一lp作为刺激浓度。通过RD一PCR技术获得86条有明显表达差异的条带，经RNase保护分析，确认有41个片段为真正阳性片段。在这些阳性片段中①发现了14个未知功能的新基因片段，己经全部被GeneBanK收录，登录号为:CB518127、CB518128、CB518129、CB518130、CB518131、CB518132、CB518133、CB518134、CB518135、CB518136、CB518137、CB518138、CB518139、CB518140。②己知基因有27个，其中文献报道过与IL一p对p细胞的破坏有关的片段13个，文献未报道过的9个，未知功能的片段5个。 结论:用Rl)PCR技术分离得到了与IL一lp对p细胞破坏有关的基因和新基因，认为iNOS、HmoXI、SRP72、RR.MI、犯Fl 3A等基因与p细胞的破坏密切相关，从千扰这些基因的功能入手寻找药物干预p细胞的破坏过程，可能对I型糖尿病的预防和治疗提供新的途径。