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目的:构建新型环境pH和氧化还原双敏感性的两性离子纳米粒,探究其对肺肿瘤靶向输送STAT3-siRNA的可行性。方法:采用酯化反应和酰胺化反应,合成交联结构聚合物右旋糖酐(Dextran)-琥珀酸酐(SA)-胱胺(Cytamine),即 Dextran-SA-Cystamine(DeSC),通过核磁氢谱(1H-NMR)和傅里叶红外(FT-IR)对中间体和终产物结构进行了表征。采用自组装法制备空白纳米粒(DeSC-NPs),通过静电吸附作用,获得负载基因复合物(PEI/siRNA complexes)的纳米粒(siRNA@DeSC-NPs)。通过琼脂糖凝胶电泳法,依据负载效率,筛选纳米粒的处方组成。测定DeSC-NPs的粒径大小和表面电位,考察其对环境pH和氧化还原条件的敏感性,以及对siRNA的保护作用和不同介质中的体外释放度的影响。MTT法检测DeSC-NPs对A549细胞和293T细胞的安全性,通过流式细胞仪(FCM)和激光共聚焦显微镜(CLSM)分别评价FAM-siRNA@DeSC-NPs的A549细胞摄取率与细胞内分布。通过FCM和MTT法分别考察STAT3-siRNA@DeSC-NPs被摄取后A549细胞凋亡及细胞抗增殖能力的影响。采用RT-qPCR法考察STAT3 mRNA的基因沉默效果,采用Western Blot法考察STAT3的蛋白沉默效果。通过胸腔注射荧光素酶转染标记的A549细胞(Luciferase-A549)建立原位肺癌裸鼠模型,小动物活体成像仪观察尾静脉注射和肺部吸入Cy5-siRNA@DeSC-NPs后的体内分布,并比较给药途径对STAT3-siRNA@DeSC-NPs的肿瘤生长抑制效果的影响。结果:通过1H-NMR和FT-IR均验证了聚合物材料(DeSC)的成功合成,其细胞毒性较低,具有良好的生物相容性。制备的纳米粒(DeSC-NPs)具有合适的粒径,大约为235 nm,粒度分布均匀,在pH7.4环境中的电位为-7.3 mV,在pH6.5环境中的电位为9.7 mV,在pH5.0的环境中的电位为26.3 mV,具备电荷翻转的功能;荧光分光光度法结果显示,DeSC-NPs具有氧化还原敏感性,体外释放结果表明在肿瘤环境纳米粒可以有效地释放游离的siRNA发挥作用。抗RNAse酶降解实验结果表明,DeSC-NPs对siRNA具有较好的保护作用。FCM和CLSM结果显示,A549细胞的DeSC-NPs摄取具有时间依赖性和pH依赖性,所负载siRNA可通过PEI和DeSC的质子海绵效应有效地从溶酶体中逃逸,实现了 siRNA的高效递送。STAT3-siRNA@DeSC-NPs能够有效地沉默STAT3 mRNA和STAT3蛋白,促进细胞凋亡。体内分布实验和药效实验结果表明,DeSC-NPs通过尾静脉给药和肺部吸入给药均能在肺部蓄积,有效地抑制肿瘤增长,通过各个脏器的H&E染色结果证明纳米粒的毒副作用低。结论:琥珀酸酐-胱胺修饰的右旋糖酐纳米粒(DeSC-NPs)具有较好的pH依赖性电位翻转的功能和氧化还原敏感性,可高效靶向递送STAT3-siRNA,有效地沉默STAT3的蛋白表达以及抑制肿瘤生长。