脊髓硬膜外电刺激对步行CPG可塑性的影响

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实验目的:明确硬膜外电刺激对脊髓损伤大鼠后肢运动功能的影响,研究后肢运动功能改变与脊髓组织内谷氨酸、γ-氨基丁酸受体表达间的关系,通过其两者之间相关性分析,阐述硬膜外电刺激对步行功能的改善与步行CPG可塑性变化之间的关系。方法:雌性SD大鼠27只,随机分为假手术组、脊髓损伤后硬膜外电刺激组和单纯脊髓损伤组。每组分别取一周、两周及四周三个时间点,分别对四组大鼠进行BBB学评分、神经电生理检查、脊髓组织病理切片染色及脊髓胸13腰1节段组织免疫荧光染色。通过对比电刺激组和单纯损伤组大鼠行为学、腓总神经传导检查、腓肠肌肌电图、脊髓损伤部位病理改变及脊髓组织内神经递质(谷氨酸、γ-氨基丁酸)受体表达量和受体阳性神经元计数的变化之间的关系。明确硬膜外电刺激对不完全脊髓损伤大鼠脊髓后肢步行功能的影响,及其与步行中枢模式发生器可塑性改变间的关系。结果:1.硬膜外脊髓电刺激组大鼠BBB评分普遍高于单纯损伤组大鼠BBB评分,经统计学分析硬膜外电刺激组大鼠BBB评分在一周、两周、四周三个时间较单纯损伤组均有差异(P<0.05);2.通过神经电生理检查结果腓总神经运动传导速度及复合动作电位波幅在硬膜外电刺激后均有所改善,腓肠肌肌电图在自发性电活动方面(纤颤电位、正锐波)无明显恢复;3.通过病理切片发现,电刺激组与单纯脊髓损伤组大鼠在神经再生等病理学改变方面无明显改善;4.免疫荧光染色结果:脊髓损伤后谷氨酸、γ-氨基丁酸受体在脊髓组织内表达量以及受体表达阳性神经元个数均明显降低,通过电刺激后受体阳性神经元个数较单纯损伤组均显著增高(P<0.05),四周电刺激组表达最明显。结论:1.硬膜外脊髓电刺激可增强脊髓损伤大鼠后肢步行功能的恢复。2.硬膜外电刺激改善大鼠后肢步行功能与神经元再生及神经功能恢复无明显关系3.硬膜外电刺激可以提高脊髓损伤大鼠脊髓内谷氨酸受体1及γ-氨基丁酸B型受体1高表达。4.谷氨酸介导的兴奋性突触传递是步行CPG内最主要的兴奋性活动,γ-氨基丁酸介导的抑制性突触传递则是步行活动中肌肉协调、控制速度和节律性的关键,因此,我们推测硬膜外电刺激改善脊髓损伤大鼠后肢步行功能与增强脊髓内步行CPG可塑性有关。
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