背景和目的 口腔白斑(oral leukoplakia，OLK)是口腔粘膜中最常见的癌前病变，癌变率可达9％～19％，平均癌变病程达8.2年。因其有较高的癌变率和较长的癌变病程而日益受到研究者们的关注。OLK最终恶变结果为口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)。OSCC是口腔中最常见的恶性肿瘤，占口腔恶性肿瘤的80％以上，全世界每年约有30，000人被确诊为OSCC。因此，监测OLK的恶变潜能及OSCC的早期诊断对指导临床治疗具有非常重要的意义。研究表明OLK及OSCC的发生发展是一个多阶段、多步骤的过程，在这个过程中涉及许多基因的改变，而人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase，hTERT)和癌基因c-myc的改变可能是其主要内容。最近研究表明端粒酶(telomerase)不仅是大多数肿瘤的敏感标志之一，而且与细胞增殖也密切相关，而hTERT的表达是端粒酶激活的限速步骤。同时研究者们还发现c-myc基因是hTERT基因的启动因子之一。hTERT蛋白和c-myc蛋白可近似地反映hTERT基因和c-myc基因的表达情况。增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)则是一个很成熟的检测细胞增殖水平的指标。本课题应用免疫组化技术研究了OLK和OSCC中hTERT蛋白、c-myc蛋白及PCNA的表达，以了解它们的表达与OLK和OSCC发生发展的关系。方法 本项研究的标本选自郑州大学第一附属医院病理科存档的经福尔马林固定、石蜡包埋的蜡块，其中包括OLK45例和OSCC37例。在OLK中，单纯增生性口腔白斑15例、轻度异常增生性口腔白斑10例、中度异常增生性口腔白斑H例、重度异常增生性日腔白斑9例。OSCC按细胞分化程度分为I级13例，H级12例，m级12例。12例正常口腔粘膜组织作为正常对照。采用免疫组化技术对所有标本进行hTERT蛋白、。一myc蛋白及PCNA染色，分别计算hTERT蛋白及c一myc蛋白阳性表达率，同时计算PCNA增殖指数。最后对各组数据进行统计学处理。结果 1.正常口腔粘膜hTERT蛋白染色阴性。在OLK中hTERT蛋白染色强度与细胞异常增殖程度有明显相关性(P<0.01)。在OSCC中hTERT蛋白染色强度与细胞分化程度有明显相关性(P<0.01)。正常口腔粘膜组、单纯增生性白斑组、不典型增生性白斑组及鳞癌组hTERT蛋白表达的阳性率分别为:O%(0/12)、26.67%(4/15)、56.67%(17/30)、83.78%(31/37)，且上述四组间hTERI，蛋白表达阳性率有差异性 (P<0.01)。值得注意的是，在单纯增生性白斑组和不典型增生性白斑组hTERT蛋白表达阳性细胞分布模式的不同可作为监测OLK异常增殖的辅助诊断指标。 2.正常的口腔粘膜c一myc蛋白为阴性染色。不典型增生性白斑组中不同异常增殖程度之间c一myc蛋白表达阳性率无明显差异(P>0.05)。OSCc组中不同细胞分化程度之间c一myc蛋白阳性表达率无明显差异(P>0.05)，但正常口腔粘膜组、单纯增生性白斑组、不典型增生性白斑组和口腔鳞癌组之间c一myc蛋白表达阳性率有显著性差异(P<0.01)。 3.PCNA在各组标本中均有表达，但PCNA增殖指数各组标本各不相同。从正常口腔粘膜到OLK再到OSCC，PCNA增殖指数逐渐升高，PCNA增殖指数除在郑州大学2003届硕士研究生毕业论文人口腔白斑及鳞状细胞癌中hTERT蛋白、c一mvc蛋白及PCNA表达的研究正常口腔粘膜组和单纯增生性白斑组之间无明显差异外，其余各组两两之间均有显著性差异(P<0.01)，且PCNA阳性细胞的分布在上述各组中均不相同。 4.按hTERT蛋白染色结果将病变标本分为hTERT蛋白阳性组和阴性组，c一myc蛋白的表达和hTERT蛋白的表达具有很好的相关性(P<0.01)，两组间PCNA增殖指数有显著性差异(P<0.01)。结论 1.hTERT蛋白的表达与细胞增殖及肿瘤的发生均密切相关，可能是监测OLK的恶变潜能及OSCC早期诊断的敏感指标之一。 2.在单纯增生性白斑和不典型增生性白斑中，hTERT蛋白表达阳性细胞分布模式的不同可作为监测OLK是否异常增殖的辅助指标。 3.c一myc蛋白的表达与细胞的恶性转化密切相关，且c一myc蛋白的表达与hTERT蛋白的表达具有密切相关性，从而可在细胞水平上证实c一myc基因是激活hTERT基因的启动因子之一。 4.PCNA增殖指数能较好地反映口腔粘膜病变的细胞增殖水平，PCNA阳性细胞表达模式能较好反映OLK的不典型性增生，可作为辅助诊断指标。