耐盐碱细菌筛选与生物菌肥对盐碱地作物的影响

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盐碱地资源是我国重要的土地资源。盐碱地面积巨大,如何开发和利用一直是一个热点问题。通过植物根际促生菌(PGPR)制成的微生物肥料在提高盐碱地的利用率等方面发挥着重要作用。本研究丰富了耐盐碱植物根际促生菌资源库,增加了对耐盐碱植物根际促生菌的认识,为开发新型的适用于盐碱地的微生物肥料奠定了基础。论文还研究了微生物肥料应用在盐碱地当中对玉米、小麦产量的影响。论文对6株耐盐碱植物根际促生菌(分别编号为6CW15、6WW6、30-04J-2、6R3、6R8、30-04J-1),利用16S rDNA序列初步鉴定,六株菌分别为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis),高地芽孢杆菌(B.altitudinis),暹罗芽孢杆菌(B.siamensis),贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis),枯草芽孢杆菌(B.subitis),深红沙雷氏菌(Serratia rubidaea)。对各菌株耐盐碱能力进行测定,6WW6、6CW15菌株耐盐碱性最强,最高能耐受11%的氯化钠浓度,最高能耐受pH为11。在盆栽试验中,各个菌株在不同的盐浓度土壤中对玉米的性状都有不同程度的影响。在不同的盐碱程度的土壤中,菌株对玉米地上部和地下部的干鲜重影响最显著,同时能够明显提升玉米种子的出苗率。在未经盐碱混合溶液处理的土壤中经6CW15处理的玉米植株地上部鲜重增加了62.92%,地上部干重增加了43.63%,达到极显著差异水平(p<0.01),其促生效果最好。经6R8处理的植株地下部鲜重增加了33.67%,经30-04J-1处理的植株地下部干重增加了52.90%,达到了显著性差异水平(p<0.05)。在40mmol/L混合盐碱溶液处理的土壤中,经30-04J-1处理的玉米植株地上部鲜重增加了56.96%,地上部干重增加了40.28%;经6WW6处理的植株地下部鲜重增加了31.87%,地下部干重增加了43.45%,达到了显著(p<0.05)或极显著(p<0.01)差异水平。在120mmol/L混合盐碱溶液处理的土壤中,经6R3处理的玉米植株地上部鲜重增加了137.93%,地上部干重增加了102.79%,达到极显著性差异水平(p<0.01)。经30-04J-2处理的玉米植株地下部鲜重增加了94.52%,地下部干重增加了61.11%,达到了极显著性差异水平(p<0.01)。依据盆栽结果和菌株的耐盐碱特性选择高地芽孢杆菌(B.altitudinis)6WW6进行全基因组测序分析挖掘其耐盐促生等功能基因,在其基因组中检测到1个与产生长素相关的基因,8个与产酸溶磷相关的基因,9个与产铁载体相关的基因,12个与促进植物耐盐相关的基因,13个与自身耐盐相关的基因。田间菌肥试验表明,DZCD-2菌肥可以显著提高作物产量,经DZCD-2菌肥处理的玉米和小麦产量在各个处理组当中都是最高的。在盐分3‰、4‰、5‰地块,经DZCD-2菌肥处理的玉米产量均比未施肥和施加常规化肥有所增加,且达到了显著性差异(p<0.05)。其中在盐分5‰地块,经DZCD-2菌肥处理的玉米产量比未施肥增加了111.06%达到极显著性差异(p<0.01);比施加常规化肥增加了10%,比普通有机肥处理增加了22.06%,比DZCD-1菌肥处理增加了17.50%。在盐分4‰地块中,施加DZCD-2菌肥处理的小麦产量与未施肥处理的小麦产量相比增加了103.32%达到极显著性差异(p<0.01)。经DZCD-2菌肥处理的小麦根际土进行细菌群落多样性分析发现,不同盐碱浓度的土壤中变形菌门所占的比例均是最大的。土壤Chao指数明显上升,说明土壤中的菌群多样性更加丰富。在低盐碱土壤中,Hirschia、硝化螺菌属(Nitrospira)、Terrimonas较其他处理组相比有明显增加。在高盐碱土壤中,Iamia,黄杆菌属(Flavobacterium),Marinicella,赭黄嗜盐囊菌属(Haliangium),Illumatobacter,土微菌属(Pedomicrobium)较其他处理组相比有明显增加。
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