论文部分内容阅读
p73基因是p73基因家族的第一个新成员,是1997年8月一个法国和美国联合研究小组在筛选介导胰岛素信号传递的因子时偶然得到的一个假阳性cDNA克隆,测序发现与p73非常相似,被称为p73.其蛋白产物与p73蛋白在结构和功能上都有着惊人的相似,因互引起了肿瘤生物学家的极大关注.该研究首先应用于RT-PCR`Nested RT-PCR及HhaI限制性内切酶消化的方法,检测了结肠癌LS174T细胞系p73mRNA第14外显子中Ala557处的多态性位点.为深入研究结肠癌LS174T细胞系中5端序列发生变异的p73基因的新转录产物的结构和功能,研究人员应用5-RACE方法(Rapid Amplifica-tion of cDNA Ends,cDNA末端快速扩增)获得了等位基因(p73αCTGGA)的两个5-RACE片段,大小分别为2.0kb和1.6kb.研究人员推测这个新外显子E1b的5末端可能是p73cDNA的一个新的转录起始位点(即mRNA和CAP位点),也就是说,p73基因可能有两个转录起始位点,各自受到不同的启动子的调控.从这两个不同的转录起始位点开始转录,并经变位剪接(alternative splicing)可产生不同的转录产物.5非翻译区结构与蛋白质翻译起始作用的调控有着密切的关系.该研究表明,应用5-RACE方法在人结肠癌LS174T细胞系中克隆出的p73cDNA5端序列变异的新外显子E1b,可能含有p73cDNA的一个新的转录起始位点,并参与了p73基因转录和翻译水平的广泛调节.