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目的:以原发性肝癌、乙型肝炎肝硬化及慢性乙型肝炎患者为研究对象,测定患者血液及组织中HMGB1基因和蛋白的表达及分布情况,探讨HMGB1在肝癌及乙型肝炎肝硬化患者中的表达情况,分析其临床意义,为肝癌的临床治疗提供理论依据。方法:按原发性肝癌、乙型肝炎肝硬化及慢性乙型肝炎的定义和诊断标准选择病例,共收集肝癌患者40例;乙型肝炎肝硬化患者（包括代偿期和失代偿期）共收集30例;慢性乙型肝炎患者（包括慢性迁延性肝炎和慢性活动性肝炎）共收集38例;正常对照组包括23例健康体检者（血清）和10例肝血管瘤患者（正常肝组织）,排除机体感染、自身免疫性疾病及其他肿瘤存在;收集原发性肝癌根治性切除术后肝内复发病例20例。1.用实时定量PCR及ELISA（Enzymelinked immunoassay,酶联免疫吸附）法检测血清中HMGB1基因及蛋白的表达情况。2.用实时定量PCR、Western blot（免疫印记）、免疫组化检测肝组织中HMGB1基因及蛋白的表达情况,以及HMGB1蛋白的分布情况。结果: 1. ELISA结果显示,肝癌组外周血清中HMGB1浓度为98.85±41.42ng/ml,肝硬化组HMGB1浓度为66.6±28.99ng/ml,慢性乙型肝炎组HMGB1浓度为48.6±18.38ng/ml,健康对照组HMGB1浓度为36.6±7.07ng/ml,肝癌、乙型肝炎肝硬化及慢性乙型肝炎患者血清中的HMGB1水平均明显高于健康对照组（P<0.05）;肝癌及乙型肝炎肝硬化患者血清HMGB1水平明显高于慢性乙型肝炎组（P<0.05）;肝癌患者血清HMGB1水平明显高于乙型肝炎肝硬化组（P<0.05）。复发性肝癌组血清HMGB1含量为83.85±13.79ng/ml,复发性肝癌组HMGB1含量明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P <0.05）。2.实时定量PCR结果显示,肝癌组外周血中HMGB1 mRNA与健康对照组相比,其2-△△CT>2,结果有显著差异;乙型肝炎肝硬化组HMGB1 mRNA与健康对照组相比,其2-△△CT>2,结果有显著差异。3.肝癌组外周血清HMGB1蛋白表达水平与患者性别、年龄、肿瘤分化程度无关（P>0.05）;而与肿瘤的TNM分期、AFP、肿瘤大小、病理学分级、淋巴结转移、HBV含量以及是否伴乙型肝炎肝硬化相关（P <0.05）。4.肝癌组外周血清HMGB1表达水平与AFP相关（r=0.823, P <0.05）。5. Western blot结果显示,肝癌、乙型肝炎肝硬化及慢性乙型肝炎组肝组织中的HMGB1总蛋白水平与健康对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;肝癌及乙型肝炎肝硬化组肝组织中的HMGB1总蛋白水平与慢性乙型肝炎组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。肝癌组、肝硬化组胞核内HMGB1含量与正常对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;肝癌组、肝硬化组胞浆内HMGB1含量与正常对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;不同病理情况的复发性肝癌组HMGB1蛋白与复发性肝癌癌旁组织及正常对照组相比,差异有统计学意义（P<0.05）。6.实时定量PCR结果显示,肝癌组组织中HMGB1 mRNA与健康对照组相比,其2-△△CT>2,结果有显著差异;乙型肝炎肝硬化组组织中HMGB1 mRNA与健康对照组相比,其2-△△CT>2,结果有显著差异;慢性乙型肝炎组组织中HMGB1 mRNA与健康对照组相比,其2-△△CT>2,结果有显著差异。乙型肝炎肝硬化组中HMGB1 mRNA表达量与慢性乙型肝炎组中HMGB1 mRNA表达量相比,其2-△△CT=1.46,无显著性差异;原发性肝癌中HMGB1 mRNA表达量与乙型肝炎肝硬化组中HMGB1 mRNA表达量相比,其2-△△CT=1.54,无显著性差异;原发性肝癌中HMGB1 mRNA表达量与慢性乙型肝炎组中HMGB1 mRNA表达量相比,其2-△△CT=2.25,结果有显著性差异。7.免疫组化结果显示,肝癌组HMGB1蛋白主要在细胞胞浆中表达,肝癌组细胞胞浆阳性表达率较正常组高,其差异有统计学意义;乙型肝炎肝硬化组HMGB1蛋白主要在细胞胞浆中表达,乙型肝炎肝硬化组胞浆阳性表达率比正常组高,其差异有统计学意义;正常肝组织HMGB1蛋白主要在细胞核内表达,细胞浆中几乎无表达;慢性乙型肝炎组HMGB1蛋白主要在细胞核内表达,细胞浆内仅有少量表达。结论: 1.肝癌患者外周血及组织中HMGB1 mRNA及蛋白的表达明显高于正常对照组,表明HMGB1可能与肝癌的发生发展有密切相关性。2.慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化及肝癌患者外周血及组织中HMGB1mRNA及蛋白的表达明显高于正常对照组,表明HMGB1基因可能参与了慢性乙型肝炎到乙型肝炎肝硬化及肝癌的发展过程。3.HMGB1在慢性乙型肝炎组织细胞胞浆及胞核中均高表达,表明HBV可能刺激肝细胞合成、分泌HMGB1,促进肝细胞增殖,进而发展为肝硬化。4.HMGB1在肝癌及肝硬化组织胞浆中高表达,表明HBV可能刺激肝细胞合成、分泌HMGB1至细胞浆或细胞外,进一步表明HMGB1可能参与了慢性乙型肝炎到肝硬化或肝癌的发展过程。5.HMGB1蛋白在复发性肝癌患者血清及组织均高表达,表明HMGB1可能参与了原发性肝癌手术后肿瘤微环境的复发。6.血清HMGB1的表达与肿瘤的TNM分期、病理学分级及淋巴结转移相关,表明HMGB1可能与肝癌的复发、浸润转移有关。7.HMGB1在细胞核及细胞浆内分布不一样,表明HMGB1分布对其功能产生重要影响。8.联合检测肝癌患者外周血清中HMGB1与AFP含量可能对肝癌的诊断、监测病情进展及判断复发有指导意义。