CRH和Fas系统在小鼠束缚应激过程中对卵母细胞发育能力的影响机制

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随着社会的发展,生活节奏的加快,人们承受的心理压力越来越大。女性身兼数职于一身,更容易受到应激相关疾病的影响。应激会造成生殖内分泌紊乱、诱发退化性疾病和女性早衰。应激时下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴产物,从多水平对雌性生殖系统产生抑制作用。CRH在束缚应激损伤卵母细胞发育能力过程中发挥重要作用,但是CRH诱发卵巢细胞凋亡的机理不清楚。此外,研究发现应激会激活Fas信号通路,而在应激过程中CRH与Fas信号通路是否存在关联尚不清楚。因此,采用小鼠束缚应激模型,对小鼠进行持续应激24 h或48 h。通过检测束缚应激对卵巢细胞(壁颗粒细胞和卵母细胞)凋亡影响,研究Fas信号通路和CRH在卵巢细胞凋亡中的作用,从而探讨束缚应激损伤卵母细胞发育能力具体机制。研究结果表明:(1)束缚应激24 h或48 h后,卵母细胞成熟率与对照组相比没有显著差异(P>0.05),说明连续束缚应激24 h或48 h不影响卵母细胞核成熟。(2)束缚应激24 h与对照组相比卵母细胞激活率、4-cell率、囊胚率以及囊胚细胞数差异均不显著(P>0.05),说明连续束缚24 h不会对卵母细胞胚胎发育能力造成影响;连续束缚应激48 h与对照组相比卵母细胞激活率没有显著差异(P>0.05),但4-cell率、囊胚率以及囊胚细胞数都显著下降(P<0.05)。因此,束缚48 h会造成胚胎发育能力下降。(3)束缚应激48 h组与对照组和束缚应激24 h组相比,血清和卵巢中CRH含量显著上升(P<O.05),而且壁颗粒细胞中CRHR1蛋白表达也显著提高(P<0.05)。(4)束缚应激48 h组与对照组和束缚应激24 h组相比卵巢细胞(壁颗粒细胞和卵母细胞)凋亡比例均显著增加(P<0.05)。(5)束缚应激48 h组与对照组和束缚应激24 h组相比壁颗粒细胞中Fas和FasL蛋白表达显著升高(P<0.05),而且卵母细胞中Fas蛋白表达也显著升高(P<0.05)。(6)在小鼠束缚应激48h过程中注射CRHR1拮抗剂(antalarmin)后,4-cell率、囊胚率与注射溶剂组都显著提高(P<0.05)。综上所述,束缚应激通过增加血清和卵巢中CRH以及壁颗粒细胞中CRHR1表达,激活Fas信号通路诱导卵巢细胞凋亡,从而损伤卵母细胞发育潜能。
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