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查耳酮合酶(Chalcone Synathase,CHS)在植物体内控制三分子丙二醜-CoA与一分子香豆酰-CoA缩合成柚皮素查耳酮,构成C6-C3-C6的基本骨架,然后在酶的作用下衍生成其它黄酮类物质,因此查耳酮合酶(CHS)为植物体内控制黄酮类物质生成的限速酶。已有研究表明,查耳酮等黄酮类物质具有抑菌活性,且查耳酮合酶(CHS)基因参与植物抵抗病原菌侵染的过程。本研究采用菌丝生长速率法,评价查耳酮对11种芒果病原菌的抑菌效果;然后通过同源克隆的方法扩增出芒果的CHS1、CHS2基因的DNA与cDNA序列,将其命名为MiCHSI、MiCHS2,并运用生物信息学进行功能分析;通过实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)探明MiCHS基因在芒果组织中的表达差异性;最后分析芒果组织中MiCHS基因表达量与芒果病原菌、叶面肥、杀菌剂等胁迫处理之间的关联。主要研究结果如下:(1)查耳酮对11种芒果病原菌均具有明显抑制活性,对芒果小穴壳蒂腐病病原菌PZ5(Botryosphaeriadothidea)的抑制效果最好,对芒果畸形病病原菌MMD27(Fusariumproliferatum)的抑制效果最差。(2)MiCHS1基因 cDNA 大小为 1173 bp,MCHS2基因 cDNA大小为 1194 bp,MiCHS1与MiCHS2基因均具有两个外显子和一个内含子。MiCHS1与MiCHS2基因控制合成的蛋白质是不具有信号肽稳定的多磷酸化位点的两性蛋白质。它们含有多个丙二酰-CoA结合位点,属于羧化酶超家族。MiCHS1与MiCHS2蛋白质的二级结构主要包括α-螺旋、β-折叠、转角三种结构。(3)针对MICHS基因在不同器官的表达差异,通过Real-Time PCR定量分析探明了芒果不同器官中,MiCHS1基因在叶片中表达量最高,果实次之,嫩稍和花芽最低。MiCHS2与MiCHS1基因表达基本相似。(4)针对病原菌侵染对MiCHS1基因表达影响,通过Real-Time PCR定量分析揭示了 MiCHS基因的表达受病原菌侵染诱导,当病原菌侵染芒果组织后MiCHS1和MiCHS2基因会先上调后下调,且MiCHS1基因表达量高于MiCHS2基因。叶片中MiCHS基因的表达量和查耳酮含量的变化之间有协同增减的趋向,说明MiCHS参与了植物自身防御反应。(5)针对7种杀菌剂和7种叶面肥对MiCHS基因表达的影响,通过Real-Time PCR定量分析表明:纳美、果喜、康翠、碧丰宝、硫酸铜、福鹏六种叶面肥处理对芒果叶片MiCHS1和MiCHS2基因具有上调作用;甲基托布津、噻菌灵、多菌灵、丙环唑四种杀菌剂对芒果叶片中MiCHS1和MiCHS2基因具有上调作用。说明叶面肥和农药等田间投入品能够诱导MiCHS基因的上调表达,对病害的防治具有一定的借鉴意义。