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目的:对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP)是临床上常用的解热镇痛药,治疗剂量不当可以导致严重的肝损伤,严重者甚至引起不可逆转的肝功能衰竭。近年来,药物性肝损中继发的炎症、免疫应答对肝脏的二次损伤日益受到关注。小RNA(microRNAs,miRNAs)是可以在转录水平发挥作用,进而调节各种生物学功能的重要分子,本研究主要探索APAP诱导肝损伤后候选microRNAs的变化,以及microRNA在药物性肝损伤中发挥的作用及可能的机制。内容及方法:利用C57 BL/6小鼠腹腔注射不同剂量APAP,观察血清转氨酶(ALT、AST)和生存率结果筛选稳定的剂量,进一步利用HE染色和免疫组化指标,建立APAP诱导的药物性肝损伤模型,检测其肝脏和血浆中候选microRNAs的变化,明确APAP诱导的药物性肝损模型特征microRNA表达谱。利用miR-31敲除小鼠跟野生型小鼠(WT)对照,观察miR-31对药物性肝损伤模型的影响,进一步利用纳米材料包被miR-31制备miR-31过表达小鼠模型,与WT小鼠相比,验证miR-31在药物性肝损伤中的保护作用。RT-PCR检测miR-31不同表达模型中炎症因子的变化,初步探讨miR-31在APAP诱导药物性肝损伤中对炎症因子的影响及可能机制。结果:在APAP诱导的药物性肝损模型中,300mg/kg是APAP诱导药物性肝损伤模型的最佳剂量,血清转氨酶(ALT、AST)在3小时开始升高明显,HE染色显示肝损伤面积随时间延长而不断增大,在24小时有中性粒细胞和巨噬细胞的浸润。MiR-122在血浆中1小时后开始升高,升高6-10倍(P<0.05);miR-31在血浆中12小时后开始升高,升高4-6倍(P<0.05),在肝脏中6小时后开始降低,降低2-4倍(P<0.05)。MiR-31敲除小鼠较野生型小鼠在APAP诱导的药物性肝损伤模型中损伤程度加重,谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)升高有显著差异,HE染色显示敲除小鼠肝损伤面积较WT小鼠增大,但无统计学差异。同野生对照型小鼠相比,在microRNA-31过表达小鼠中,ALT、AST下降、HE染色病理切片肝损伤面积明显减轻。在miR-31敲除小鼠中炎症因子CXCL10、CCL5、CCL2、IL6、TNFa表达升高,IL-34无变化,在miR-31过表达小鼠中炎症因子CXCL10、CCL5、IL6、IL-34表达下降,但TNFa、CCL2没有变化。结论:初步建立了稳定的APAP诱导肝损伤模型,MiR-122可以作为肝损伤的早期生物标记物,miR-31在药物性肝损伤中具有重要的保护作用。MiR-31过表达小鼠对APAP诱导的药物性肝损伤具有保护作用,而miR-31基因敲除小鼠可以加重APAP诱导的药物性肝损伤,包括血清转氨酶(ALT、AST)升高,病理损伤加重。miR-31过表达可以抑制炎症因子和趋化因子的表达,miR-31基因敲除小鼠炎症因子和趋化因子表达增多,miR-31对APAP诱导的药物性肝损伤的作用有可能是通过影响炎症反应来实现的。