肌纤维是构成肌肉的基本单位,肌肉中肌纤维的比例和类型影响了肌肉的品质,氧化型慢肌纤维比例高的肉质更好一些。钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)参与的很多信号通路可以影响肌纤维的生长发育,研究最多和最为成熟的一个信号通路是CaN/NFAT信号通路,它可以促进向慢肌纤维的转化。研究发现MYOZ1基因可以通过抑制CaN的活性,进而通过影响CaN/NFAT信号通路参与了肌纤维转化,促进了快肌纤维向慢肌纤维的转化。为了研究和验证MYOZ1基因对猪肌纤维生长发育的作用,以及MYOZ1基因和CaN间的相互作用,本实验采用实时定量、RNA干涉和基因过表达等实验技术开展了对MYOZ1基因在肌纤维发育中功能的研究。取得的结果如下：1.在大白、长白、通城和梅山四个国内外猪种克隆比对了MYOZ1基因的包含CDS在内的1144bp序列。分析结果发现MYOZ1基因的CDS区在这四个国内外猪种中是保守的。2.运用实时定量PCR的方法,检测了MYOZ1基因在国内品种通城猪生前90d、70d、55d和生后3d、21d、35d、60d和90d八个不同生长阶段的表达情况。结果显示MYOZ1基因在通城猪中出生前表达量呈上升趋势,出生后21d内表达量逐渐降低,35d至90d又呈缓慢增长趋势,90d时表达量逐渐趋于平缓。出生后3周内是肌纤维转化的高峰期,此时MYOZ1基因表达量急剧降低,说明MYOZ1基因可能参与了肌纤维转化过程。3.运用实时定量PCR的方法,检测了MYOZ1基因在国外品种大白猪生后3d、21d、35d、60d和90d五个不同生长阶段的表达情况。结果显示MYOZ1基因在大白猪中出生后21d内的表达量急剧下降,35d后表达量基本恒定。进一步说明MYOZ1基因可能参与了肌纤维转化过程。4.运用实时定量PCR的方法,检测了猪MYOZ1基因及其调控的下游基因PPP3CA、PPP3CB和PPP3R1在背最长肌和咬肌两种不同类型肌纤维中的表达情况,结果显示MYOZl和PPP3R1在慢肌咬肌中表达量高,PPP3CA和PPP3CB在快肌背最长肌中表达量高。结果表明MYOZ1基因和PPP3CA、PPP3CB之间可能存在某种抑制关系。5.设计合成了小鼠MYOZ1基因的干涉小片段,并转染小鼠C2C12细胞,结果显示干涉掉MYOZ1基因后,PPP3CA表达量显著增加,PPP3CB、PPP3R1基因的表达量也增加,但是不显著。说明MYOZl基因在转录水平对钙调神经磷酸酶有抑制作用。6.构建了猪MYOZ1基因的过表达载体,并转染小鼠C2C12细胞,结果发现小鼠的PPP3CB基因和PPP3R1基因表达量下调,而PPP3CA基因表达量呈不显著性上调,这在一定程度上说明在猪中MYOZ1基因也对钙调神经磷酸酶有抑制作用。