野生抚育山参内生真菌的分离及其作用的研究

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近年来,植物内生真菌的研究备受关注。内生真菌生活环境特殊,生长在植物体内。内生真菌和宿主植物在漫长的进化过程中形成了互利共生的种间关系,一方面宿主植物为内生真菌提供所需营养物质,另一方面内生真菌在植物生长发育和抵御病虫害方面有着重要作用。有研究表明,有些药用植物的内生真菌可以提高宿主植物的抗病虫害及逆境的能力,并能对宿主植物的生长起到一定的作用。人参为五加科植物人参(Panax ginseng C. A. Meyer)的干燥根及根茎,在中国有着悠久的历史,是珍贵的中药材。近年来,由于森林资源的破坏和人类过度采挖,造成野生山参资源濒临枯竭。野生抚育山参无污染,生长年限长,品质高于普通园参,经济价值较高。野生抚育山参生长环境特殊,现在野生抚育山参内生真菌方面的研究很少。本文采用组织分离法对野生抚育山参根中内生真菌进行了分离鉴定,并对内生真菌的抑菌活性和促进种子萌发作用进行了研究。主要结果如下:1.内生真菌的分离方法。通过试验选出比较适合野生抚育山参根表面灭菌的方法是:先用75%乙醇消毒1min,再用5%oNaC1O6min肖毒,最后用75%乙醇消毒1min。以1/2PDA培养基作为分离培养基。2.野生抚育山参内生真菌分离结果。从不同季节的野生抚育山参根中分离得到了65株内生真菌。其中2010年10月采集的中分离得到26株,2011年5月采集的分离得到16株,2011年7月采集的分离得到23株。可以看出10月份采集的分离到的内生真菌最多。3.野生抚育山参内生真菌的鉴定。通过形态学初步鉴定出46株真菌,分别属于头孢属、青霉属、柱孢属、轮枝孢属和单端孢属,其他19株内生真菌没有产生孢子,未能鉴定出所属科属。将相同的归为一类,共得到16种内生真菌。4.内生真菌抑菌活性筛选。选用大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,白色念珠菌、香瓜枯萎病菌、水稻恶苗病菌和水稻纹枯病菌作为指示菌,对分离得到16株内生真菌进行了抗菌活性初筛,对病原细菌的抑制活性都较弱;菌株P-16发酵液对香瓜枯萎病菌抑制活性最高,菌株P-7和P-13发酵液对水稻恶苗病菌抑菌活性较高,菌株P-4、P-6和P-7发酵液对水稻纹枯病菌的抑菌活性较高。5.内生真菌发酵液促生长作用的研究。用野生抚育山参内生真菌发酵液对黄芪、小白菜、水萝卜种子进行处理,进行发芽试验。结果表明,菌株P-9发酵液对黄芪种子萌发的促进作用最强,P-16发酵液对水萝卜种子萌发促进作用最大。并对内生真菌产IAA情况进行测定,结果表明,菌株P-1、P-5、P-9和P-10只在培养48h的发酵液中测到了IAA含量,其他时间内都未检测到。其他14株内生真菌都能产生一定的IAA,但是产生IAA的能力具有较大差异。
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