【摘 要】
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[目的]研究衣原体蛋白pGP3及其中间段pGP3M通过结合LL-37对浆细胞样树突状细胞活化的影响。[方法]通过DNA抽提试剂盒提取银屑病患者皮损中总DNA,琼脂糖凝胶电泳验证提取结果,紫外分光光度法检测其浓度。取健康者新鲜血,使用人外周血淋巴细胞分离液(FICOLL配置)分离单个核细胞,用CD304(BDCA-4/Neuropilin-1)树突状细胞分离试剂盒(Miltenyi Biotec)纯
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[目的]研究衣原体蛋白pGP3及其中间段pGP3M通过结合LL-37对浆细胞样树突状细胞活化的影响。[方法]通过DNA抽提试剂盒提取银屑病患者皮损中总DNA,琼脂糖凝胶电泳验证提取结果,紫外分光光度法检测其浓度。取健康者新鲜血,使用人外周血淋巴细胞分离液(FICOLL配置)分离单个核细胞,用CD304(BDCA-4/Neuropilin-1)树突状细胞分离试剂盒(Miltenyi Biotec)纯化p DCs。使用流式细胞术检测分离后p DCs纯度。将纯化后的p DCs分为7组,接种于96孔圆形底板中,加入含10%FBS的RPMI 1640。将不同浓度的蛋白pGP3(10ug/ml)、pGP3(100ug/ml)、pGP3M(10ug/ml)、pGP3M(100ug/ml)分别与LL-37(10ug/ml)在37℃下预先混合培养,后将蛋白与LL-37的混合物分别与DNA(30ug/ml)进行预混合培养30 min,然后将混合物加入p DCs培养物中共培养,37℃,24h。收集刺激后的p DCs上清液。用ELISA试剂盒检测人IFN-α和IL-6水平。最后统计所有结果数据,分析比较pGP3及pGP3M结合LL-37后对浆细胞样树突状细胞分泌炎性因子水平的影响。[结果]pGP3及pGP3M干预组较LL-37组中INF-α表达水平下调,高浓度组较低浓度组下降更显著(P<0.05)。pGP3及pGP3M干预组较LL-37组中IL-6表达水平上调,高浓度组较低浓度组升高更显著(P<0.05)。[结论]衣原体蛋白pGP3及其M段蛋白结合LL-37后对浆细胞样树突状细胞分泌INF-α呈抑制作用,对IL-6的分泌呈刺激作用。
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