【摘 要】
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[目 的]环状RNA(Circular RNA,circRNA),是一种具有共价闭合环状结构的非编码RNA。按照形成机制的不同其分为三类:外显子环化环状RNA(Exonic circRNA,ecircRNA)、内含子环化环状
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[目 的]环状RNA(Circular RNA,circRNA),是一种具有共价闭合环状结构的非编码RNA。按照形成机制的不同其分为三类:外显子环化环状RNA(Exonic circRNA,ecircRNA)、内含子环化环状 RNA(Circular intronic RNA,ciRNA)、外显子-内含子共同环化环状RNA(Exonic-intronic circRNA,EIciRNA)。目前研究发现,circRNA参与肿瘤发生发展的多个步骤。肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,其居高不下的发病率和死亡率严重危害着全人类的生命健康。近年来对于circRNA在肺癌中的作用研究也日益增多,随着越来越多的circRNA被发现和阐释,其有望成为肺癌新一代诊断和治疗的靶点。本研究前期先用circRNA芯片检测3对肺癌和癌旁组织中差异性表达的circRNA,筛选出3个差异性表达明显的circRNA。然后选择差异水平较高的hsacirc0005579进行后续的肺癌细胞H292和H460功能试验,包括肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移、周期和凋亡实验,探究高表达和低表达hsacirc0005579在肺癌细胞H292、H460中是否有细胞功能上的差异。[方法](1)通过circRNA芯片筛选出差异性表达明显的circRNA;(2)构建hsacirc0005579表达质粒;(3)hsacirc0005579表达质粒转染肺癌细胞H292和H460,对照组转染空质粒;(4)qRT-PCR验证hsacirc0005579表达质粒转染后H292和H460细胞中hsacirc0005579的表达水平;(5)进行肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移、周期和凋亡实验,观察不同hsacirc0005579表达量的细胞其功能是否不同。[结 果]1、circRNA 芯片结果显示:hsacirc0005579、hsacirc0073716 和hsacirc0089972在肺癌组织和癌旁组织中表达具有差异性。2、细胞功能实验显示,过表达hsacirc0005579会抑制肺癌细胞H292和H460增殖、侵袭、迁移能力,同时抑制细胞周期,促进细胞凋亡。[结 论]过表达hsacirc0005579抑制H292和H460细胞的增殖、侵袭、迁移和周期,促进其凋亡。
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