基质γ-羧基谷氨酸蛋白(Matrix Gla protein,MGP)是细胞外基质钙化的决定蛋白,在血管和肾脏异常钙化中表达增高。MGP在血管钙化方面研究得较为深入,具有重要的血管钙化抑制作用。肾结石是一种常见的复杂疾病,发病率和再发率高,形成机制不清,目前缺乏有效的预防和治疗措施。草酸钙肾结石是最常见的肾结石疾病,与血管钙化具有很多相似的特点。钙化相关蛋白在不同的钙化形成过程中可发挥类似的作用,钙化抑制蛋白的缺失或功能改变将增加钙化形成风险。我们在前期工作的基础上推测MGP蛋白很可能通过影响结晶与肾小管上皮细胞的相互作用,参与抑制结石形成。本文以肾结石患者和健康人的血液DNA为研究对象,研究MGP基因多态性变异与肾结石疾病发病风险关系。首先,用血基因组DNA提取试剂盒从全血中提取人全基因组DNA,并对提取的人全基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳。实验结果显示,成功提取人全基因组DNA。通过Long-PCR方法对26例肾结石患者和28例健康人的血液样本中获得MGP基因,并对获得的MGP基因进行琼脂糖凝胶电泳。实验结果显示,成功获得MGP基因。对获得的MGP基因通过凝胶回收试剂盒进行纯化,并进行基因测序,对拟发现的18个SNPs进行基因定型。通过基因测序对MGP基因的5’非编码区(Untranslated Region,UTR)、外显子和3’-UTR区域重新测序和基因定型,识别tag SNP,并进行连锁和相关分析。结果发现,MGP基因在数据库中登陆的18个SNPs,在我们的样本中只出现了 4个SNPs,分别是SNPrs1800802、SNPrs1800801、SNPrs4236 和 SNPrs1049897。进一步分析 4 个tag SNPs,各SNPs间无连锁不平衡,未发现构成单体型,相关分析发现SNPrs4236(A/G)等位基因型与肾结石发病风险相关。进一步扩大样本,对354例肾结石患者和374例健康人,通过等位基因特异性PCR对SNPrs4236进行基因定型。相关分析发现健康人SNPrs236的G等位基因率显著高于肾结石患者(OR 1.373,95%C1 1.057-1.793,P=0.019),相关分析发现SNPrs4236等位基因型与肾结石发病风险相关。综上,本课题首次证明了 MGP基因多态性变异SNPrs4236影响中国东北地区汉族草酸钙肾结石发病风险。