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CRISPR/Cas9基因编辑系统是基于细菌和古细菌抵御外源核酸入侵的免疫机制为基础开发出来的一种新型的基因编辑技术,通过RNA介导,特异性地切割外源遗传物质来对抗入侵的病毒和质粒。其具有靶向性强、剪切效率高的特点,在高效、多位点的基因组定点修饰方面更加具有优势。目前,CRISPR/Cas9技术在基因的功能研究、基因治疗、转基因动物等研究领域具有广阔前景。SETand MYND domain-containing protein 3 (SMYD3)是一种组蛋白H3-K4甲基化酶,存在于多种恶性肿瘤如肝细胞癌、结肠癌、乳腺癌及胆管癌中,在其发生发展过程中起重要作用。SMYD3可通过与其下游基因的启动子区特异位点的结合,改变染色体组蛋白甲基化的修饰状态来调控基因表达,从而对细胞的增殖、迁移、凋亡等产生影响,但其调节机制还有待明确。本研究检测了SMYD3 mRNA在人肺癌细胞系中的表达,并利用CRISPR/Cas9技术敲除SMYD3基因后研究其对肺癌细胞恶性表型的影响。利用实时定量PCR检测了在人肺癌细胞系A549、H460中SMYD3 mRNA的表达水平,结果表明,H460肺癌细胞系SMYD3mRNA表达水平远远高于肺上皮细胞(HBE),而A549肺癌细胞系的表达水平与肺上皮细胞相差不大。另外,本研究构建了CRISPR/Cas9载体,用脂质体转染的方法对A549、H460细胞的SMYD3基因进行敲除,通过流式细胞仪分选阳性细胞后,对其进行荧光定量PCR的检测,结果显示SMYD3 mRNA的表达在人肺癌细胞系H460和A549中均被抑制,差异显著(P<0.05)。CCK-8检测法表明,敲除后细胞增殖能力降低；Traswell小室结果表明,迁移和侵袭能力降低。综上所述,SMYD3基因对肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力都具有一定作用,本研究为SMYD3基因作为癌症治疗可能的靶标基因提供了依据。