肿瘤细胞裂解物(Tumor cell lysate, TCL)是利用一定的物理或化学方法将肿瘤细胞裂解的产物,理论上认为其中含有肿瘤细胞几乎全部的抗原成分,因而可以作为肿瘤疫苗诱生多靶点的抗肿瘤免疫反应。但是由于其免疫原性较弱,需要适当的免疫佐剂的参与才能发挥有效的抑瘤作用。研究发现,结核分枝杆菌来源的热休克蛋白70(Mycobacterium tuberculosis derived Heat shock protein 70, TBHsp70)能够辅助外源性抗原进行交叉递呈进而刺激机体产生抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞,提示TBHsp70可能作为高效的免疫佐剂辅佐TCL诱发强大的抗肿瘤免疫应答。本研究利用反复冻融法制备B16黑色素瘤细胞的裂解物(B16 TCL),将其与重组TBHsp70在体外直接混合,得到了TBHsp70和B16 TCL的混合物(TBHsp70-B16TCL)。采用预防性免疫、治疗性免疫、预防结合治疗性免疫三种免疫方式,在小鼠B16黑色素瘤皮下荷瘤模型和腹腔荷瘤模型中对TBHsp70-B16TCL的抑瘤作用进行探讨。结果显示,TBHsp70-B16TCL能够明显抑制B16黑色素瘤在小鼠体内的生长和转移,明显延长荷瘤小鼠的生存期;TBHsp70-B16TCL能够诱生针对B16黑色素瘤细胞的免疫记忆和B16黑色素瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞。可见,本研究为TCL相关肿瘤疫苗的制备提供了一种新思路。