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本研究旨在分离、筛选优良同源乳酸菌株,将其制成高活性复合菌制剂应用于仔猪生产。试验从猪粪便中初步分离出30株乳酸菌,通过体外筛选得到4株优良菌株,鉴定此4株菌分别是屎肠球菌、鸡肠球菌、嗜酸乳杆菌、口乳杆菌,将其混合培养,以MRS组成为依据,设计并筛选出低成本、较高活性的最佳培养基。最后将此4株菌制成固体复合菌制剂应用于仔猪并与抗生素作对比,为乳酸菌在仔猪生产中的应用提供理论依据。1、菌株的分离、筛选、鉴定试验将MRS半选择性培养基调节至pH=5.0,从28日龄健康仔猪粪便初步分离出30株革兰氏阳性、无芽孢乳酸菌。分别编号：R1、R2、...R29、R30。通过耐酸、耐胆盐、抑菌、产酸进行体外模拟法筛选试验。在pH值2.5处理2h后存活率超过30%的菌株13株；将此13株菌株通过浓度为0.3%的胆盐后存活率超过10%的菌株剩7株。采用牛津杯法进行抑菌试验,从7株菌中筛选出对大肠杆菌、沙门氏菌有较强抑菌作用且抑菌圈直径在18mm以上的菌株有4株,对此4株菌株进行产酸试验验证,都表现出pH<4.0强的产酸能力。4株菌分别是R11、R15、R18、R22。通过显微镜(10x100)可初步观察R11、R15为球菌,R18、R22为杆菌;再通过菌落形态特征与过氧化氢酶试验、硝酸还原试验、明胶液化试验、吲哚试验、硫化氢试验、pH9.2和pH9.6生长试验、4%NaCI、16.5%NaCI生长试验、葡萄糖产酸产气、细胞运动性试验,可确定R11、R15属于乳酸菌中的肠球菌属,R18、R22属于乳酸菌中的乳酸杆菌属：再通过精氨酸产氨试验、V-P试验、各类糖、醇发酵试验进行种鉴定,R11、R15、R18、R22分别是屎肠球菌、鸡肠球菌嗜酸乳杆菌、口乳杆菌。2、菌株的复合将活化4株菌的菌液菌数调节至同一数量级,取等体积菌液按10%(v/v)接种,进行单独与混合培养,同时测定菌株OD值。混合培养后的4株菌经涂板查数、菌落特征、镜检、部分鉴定试验,平血上四株菌都存活且菌数(CFU/mL)为R11>R22>R18>R15;生长曲线测定表明混合培养OD值高于任何一株单独培养菌株,说明四株菌混合培养优于单独培养,即复合菌制剂更为理想。将菌液与载体(麦麸与豆粕粉碎1：1混合)1：1(m/m)混合,阴干避免结块,密封干燥低温保存。3、生产培养基设计与选择设计四个培养基,以豆粕、玉米面为主要原料。试验结果表明培养基Ⅱ组成成分最佳,菌液菌数可以高达1011～1012CFU/mL与配方Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ差异显著(P<0.05)；pH可降低到3.49,与单株菌在此培养基培养pH差异显著(P<0.05)4、乳酸菌制剂在乳猪(7-28日龄)与断奶仔猪(29—60日龄)上的应用复合乳酸菌制剂按0.2%比例添加到哺乳与断奶仔猪基础日粮中,并与抗生素组作对照进行饲喂试验。选择体重、窝仔数、母猪胎次、出生日期相近的纯种长白仔猪6窝,按饲养试验要求随机分为2个处理,每个处理3窝仔猪,每窝10头仔猪,分别饲喂添加抗生素与乳酸菌的两种日粮。两组仔猪哺乳期、断奶期的平均日采食量、平均日增重、每头总采食量、饲料转化率、腹泻率与死亡率差异均不显著(P>0.05)