DADS活化p38MAPK途径启动HL-60细胞G<,2>/M检查点

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目的:研究二烯丙基二硫(DADS)对HL-60细胞增殖周期的影响,探讨其诱导HL-60细胞G2/M期生长阻滞的分子机制,试图揭示细胞由G2期进入M期的启动蛋白,为肿瘤细胞的信号干预治疗提供新思路,为开发抗肿瘤新药提供新靶点.方法用不同浓度的DADS处理HL-60细胞,分别作用Oh,6h,12h,24h,48h后用苔盼蓝拒染法、MTT法测定DADS对HL-60细胞增殖的影响.流式细胞术和有丝分裂指数测定细胞增殖周期,反义/正义p53寡核苷酸(p53-ASON和p53-SON)转染以明确p53在HL-60细胞G2/M期阻滞中的地位,Western Blot检测p38 MAPK及磷酸酯酶Cdc25B和Cdc2激酶的表达和磷酸化水平,RT-PCR检测p53 mRNA与p38 MAPK mRNA的表达.结论:1 DADS能抑制HL-60细胞增殖,这种抑制作用有浓度依赖性,且能诱导HL-60细胞增殖在G<,2>/M期阻滞;2 DADS启动HL-60细胞G<,2>/M期检查点由p38MAPK介导;3 DADS启动HL-60细胞G<,2>/M期检查点不依赖p53的介导.
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