小麦叶锈菌属于专化性非常强的活体寄生真菌。本试验室前期工作已经证明，在不亲和组合中，侵染点及其周围少数细胞迅速死亡，发生过敏性反应（hypersensitivereaction，HR），从而限制菌的发育。并且前期工作通过构建叶锈菌侵染早期的小麦SSH文库及ESTs序列分析，筛选到EDS1在不亲合组合接种后表达量有所增加。EDS1蛋白是植物免疫系统中防御第一线中非常重要的一个组分。最新的研究结果揭示拟南EDS1可直接作为病原效应物的靶蛋白，通过与TIR-NBB-LRR类抗性蛋白互作调控免疫反应。由于目前在单子叶植物中还没有检测到TIR-NBB-LRR类抗性蛋白的存在，在单子叶植物中EDS1是否参与寄主抗病反应？这一问题成为我们关注的焦点。本试验以小麦品种洛夫林10分别与叶锈菌小种260、165组成不亲和组合及亲和组合，初步探讨TaEDS1在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用，取得如下结果：1、在已知的TaEDS11351bp片段的基础上，利用5’ RACE技术，向5’端延长了200bp左右。利用延长得到的约1551bp的序列进行比对，比对出一段小麦基因组DNA序列，将此序列与二穗短柄草的EDS1的CDS比对，去除内含子序列，最终得到TaEDS1完整CDS，全长1872bp。2、选取了在小麦基因表达分析中常用的8个管家基因ACTIN、ACTIN2、GAPDH、GAPDH2、ATUB、BTUB、EF1A、EF1A2以及在小麦感染条锈菌中筛选到的稳定表达的TA共9个基因作为候选内参基因，利用qRT-PCR技术及GeNorm和NormFinder软件分析，筛选到在小麦与叶锈菌互作过程，适用于实时定量PCR分析的最稳定的内参基因GAPDH。3、以GAPDH为内参基因，利用实时定量PCR检测表明TaEDS1在不亲和组合互作早期表达量明显增加。4、构建了TaEDS1亚细胞定位载体，利用基因枪法转化洋葱表皮细胞，荧光显微镜观察显示TaEDS1定位于细胞核中。5、构建了TaEDS1VIGS载体，对小麦叶片进行瞬时沉默，检测有较好的沉默效率。以上研究结果对进一步深入探讨TaEDS1在小麦抵抗叶锈菌侵染中的作用机制、阐明小麦抵抗叶锈菌侵染的分子机制具有重要意义。