引言：支气管哮喘(哮喘)是呼吸系统的常见病，其发病率在全球有不断上升的趋势。长期以来，对哮喘发生机制的认识仅局限于变应原引起的肥大细胞脱颗粒。近年来研究证明，气道炎症是哮喘发病的中心环节，而气道高反应性在哮喘发病中起着重要作用。因此，哮喘是由多种细胞，尤其是肥大细胞，嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞共同参与的慢性气道炎症。而中医学把哮喘称为哮病，哮喘缓解期以肺、脾、肾虚为本。脾为“生痰之源”，若因劳伤、食伤等伐脾，致使脾失健运，水湿停积与寒热互结必生痰浊。脾气受损，运化失职，水谷精微不能上输于肺，肺失所养，肺气不足，外卫不固，易感外邪，诱发哮喘。已有文献报道，脾虚证对哮喘的影响：增加哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中的白细胞总数，增加支气管肺灌洗液中嗜酸性粒细胞的数量；加重哮喘豚鼠气道内氧化抗氧化失衡；降低哮喘大鼠气道内cAMP／cGMP的比值。但脾虚证对哮喘气道高反应性的影响却未见报道。 糖皮质激素类药物是目前临床治疗哮喘最有效的药物，但长期使用会给患者带来许多不良反应。为了避免激素的副作用，人们设法采用其他抗炎药物来替代激素。根据中医药治疗的整体调治，在治疗疑难杂证所具有独特的优势，开发中草药新药源来治疗哮喘就具有十分重要的意义。隐孔菌为隐孔菌科隐孔菌的子实体，有舒筋活络，祛风除湿的功效，在民间用于治疗气管炎和哮喘。 浙江大学硕士学位论文最近文献报道，隐孔菌的发酵成分多糖能明显减少抗原攻击致敏豚鼠肺组织释放白三烯，抑制致敏豚鼠气管Schultz－Dale反应。还有实验研究表明，隐孔菌的发酵成分多糖对PAF诱导的嗜酸性粒细胞趋化有抑制作用，抑制致敏豚鼠抗原攻击的气道炎症和气道高反应性。这些结果表明，具有抗炎、抗变态反应作用的隐孔菌发酵物可望用于哮喘的治疗，但有关其对脾虚证哮喘小鼠作用的研究却未见报道。 目的：探究脾虚证对哮喘的影响。观察隐孔菌发酵物对脾虚证哮喘小鼠的作用，并初步探讨其作用机制。 方法：用卵白蛋白致敏小鼠，用相同抗原攻击，建立哮喘模型，再用饮食不节十劳倦过度伤脾法建立脾虚证哮喘模型。实验第1天，用0．1％卵白蛋白AI（OH）。凝胶0．lml分注于两后足掌。实验第9天始，低剂量、中剂量和高剂量组分别按0．3、0．9、2．7g／kg灌喂（ig）隐孔菌发酵物（CVFS），阳性药组则按0．sml／只灌胃黄蔑口服液，模型组按 0．sml／只生理盐水，每天一次，共 13天。实验第11天，用等量的相同浓度的卵白蛋白M①h凝胶作腹腔注射以加强致敏。实验第12天，开始造脾虚证模型，即用猪脂按30ml八g灌胃小鼠，喂服后将小鼠放入温水池中游泳至疲劳过度，以即将溺水或驱赶无力为指证。每天一次，共 10天。实验第 15天，用 1％卵白蛋白生理盐水气雾吸入进行抗原攻击30min，每天一次，共 7天。最后一次抗原攻击后 24h，右叶肺用含肝素的 1％牛血清生理盐水溶液lml行支气管肺泡灌洗，回收的灌洗液计数单位体积白细胞总数，然后离心，沉渣悬浮于含1％牛血清生理盐水溶液中涂片，干燥后用瑞氏一姬姆萨染色，进行白细胞分类计数。左叶肺用10％福尔马林溶液固定后做病理切片，苏木素一伊红染色后观察肺组织炎症变化情况并做半定量分析。摘取脾脏，称重并计算脾脏指数。另一批小鼠在最后一次卵白蛋白攻击后24h，测定不同浓度（0．125、0．25二 0．5、1．0、2．0 119／kg）氯化乙酚甲胆碱（Mob）激发后各组小鼠潮气量、跨肺压及气道流速的变化情况，分析药物对小鼠气道阻力的作用。采用 Sigma Stat统计软件进行数据处理，组间比较用学生氏 t检验。 一2一 浙江大学硕士学位论文 结 果1．CVFS对小鼠体重和脾虚证症状的影响 小鼠经抗原致敏后，体重明显减轻，表现为被致敏小鼠的体重增长明显慢于正常组小鼠（P＜0．05）。脾虚证哮喘小鼠与单纯哮喘模型小鼠比较，体重变化不明显叩川．05人 给予 CVFS 0．3和 2．7g八g治疗后，与其模型组比较，也末见明显体重增加（P＞0．05）。单纯哮喘小鼠CVFS 0．3g／kg治疗后，与其模型组比较，体重明显增加叩狈．05人但 CVFSZ．7g八g治疗组与其模型组比较，却未见体重明显增加（P＞0．05）。 与正常组小鼠比较，脾虚证哮喘小鼠表现为体毛疏松粗糙，毛色无光泽，乏力，倦怠，喜扎堆，便搪等症状。给予 CVFS 0．3g八g治疗后，上述症状还较明显，而 CVFS 2．7g八g治疗组症状明显改善，表现为毛色有光泽，便搪减轻，游泳时间延长等。结果表明：高剂量的W陀治疗具有改善脾虚证症状的作用。2．CVFS对脾虚证哮喘小鼠脾脏指数的影响 小鼠经抗原致敏后，脾脏指数明显增大，表现为致敏不攻击组和哮喘模型组（致敏＋攻击）与正常组比较，均有显著性差异（P＜0．01）。脾虚证哮喘小鼠的脾脏指数明显低于哮喘模型组u仍．01人但脾虚证哮喘小鼠给予 CVFS 0