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目的观察APE1基因表达沉默后对人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H在裸鼠体内成瘤能力的影响,及其在AP-1信号通路的作用,为进一步阐明肝细胞癌增殖及侵袭转移的分子机制提供实验依据。方法培养人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H,使用慢病毒载体介导的siRNA技术,用构建的LV-APE1-shRNA(实验组)表达载体感染MHCC97-H细胞,并设LV-APE1-NC(空载体)组和control(空白对照)组,随后将3组细胞分别接种于裸鼠皮下,第21d处死裸鼠,剥瘤称重,计算抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线。制作移植瘤组织HE切片,观察肿瘤细胞形态。采用RT-PCR及Western blot方法分别检测各组裸鼠移植瘤组织中APE1及其下游AP-1信号通路相关基因c-Fos、c-Jun、caspase-3和MMP-2的mRNA及蛋白表达水平。采用TUNEL法检测各组肝癌细胞的凋亡情况,计算凋亡指数。结果1.LV-APE1-shRNA组裸鼠移植瘤生长缓慢,肿瘤体积(0.467±0.052)cm3及质量(0.267±0.082)g均小于LV-APE1-NC组(1.700±0.063)cm3、(1.018±0.160)g和control组(1.780±0.095)cm3、(1.107±0.178)g,差异有统计学意义(P<0.01); LV-APE1-shRNA组肿瘤抑制率为73.772%。2. HE染色镜下形态显示,LV-APE1-shRNA组肿瘤组织坏死少见,较多肿瘤细胞凋亡小体,病理性核分裂<5个/HPF。LV-APE1-NC组和control组肿瘤组织坏死明显,可见散在肿瘤细胞凋亡小体,病理性核分裂>5个/HPF。3.RT-PCR结果显示,LV-APE1-shRNA组APE1、c-Fos、c-Jun、caspase-3及MMP-2的mRNA表达水平明显低于LV-APE1-NC组和control组,差异有统计学意义(P<0.01)。APE1基因沉默后可下调90.622%APE1、47.580%c-Fos、47.402%c-Jun、65.355%caspase-3、64.369%MMP-2的mRNA表达,APE1与c-Fos、c-Jun、caspase-3、MMP-2 mRNA的表达呈正相关性。4.Western blot结果显示,LV-APE1-shRNA组APE1、c-Fos、c-Jun、caspase-3及MMP-2的蛋白表达水平明显低于LV-APE1-NC组和control组,差异有统计学意义(P<0.01)。APE1基因沉默后可下调72.439%APE1、71.872%c-Fos、80.399%c-Jun、75.616%caspase-3、88.393%MMP-2的蛋白表达,APE1与c-Fos、c-Jun、caspase-3、MMP-2蛋白的表达呈正相关性。5.TUNEL法凋亡检测实验发现,LV-APE1-shRNA组肿瘤组织凋亡细胞数明显高于LV-APE1-NC组和control组,差异有统计学意义(P<0.01)。LV-APE1-shRNA组肿瘤细胞凋亡指数为5.503%,LV-APE1-NC组为2.911%,control组为2.569%。结论1.成功构建人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H裸鼠移植瘤动物模型,慢病毒载体介导的APE1基因沉默可显著抑制MHCC97-H细胞株在裸鼠体内的生长。2. RT-PCR及Western blot实验表明,APE1、c-Fos、c-Jun、caspase-3和MMP-2基因在移植瘤组织中的mRNA及蛋白表达明显受到抑制,APE1对c-Fos、c-Jun、caspase-3、MMP-2的表达具有正向调控作用。APE1可通过调控AP-1信号通路参与肝癌的增殖及侵袭转移。3.肿瘤细胞形态学观察结果和TUNEL法凋亡检测实验分析显示,APE1基因沉默可抑制肝癌细胞增殖,促进肝癌细胞凋亡。