禾本科牧草乳酸菌发现及发酵品质检测与动物生产性能影响研究

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本研究的主要目的,选择禾本科牧草——披碱草和老芒麦为主要研究对象,筛选其中所附着的优良乳酸菌(LAB);经种属鉴定确定其分类;并且将此LAB作为青贮添加剂加入披碱草和老芒麦混合牧草青贮中,研究其对青贮发酵品质的影响;将此微生物培养物作为添加剂,应用于田间青贮生产,研究所调制的青贮对家畜生产性能的影响,阐释其对青贮发酵品质与家畜生产性能改善的机理。为农牧区禾本科牧草高品质利用开辟道路,为畜牧业可持续发展提供有力保证。本研究结果表明,披碱草和老芒麦鲜牧草上附着的微生物主要以一般细菌,酵母菌,霉菌为主,它们的含量均大于106cfu/gFM(每克鲜牧草含菌落单位),乳酸菌的数量较少,最高含量低于5×104cfu/gFM。由此可知,这不能满足常规青贮乳酸菌的最低数量(>105cfu/gFM)需求。因此要想获得优质的禾本科牧草青贮必须额外添加乳酸菌才能主导发酵进行。利用倾注分离法,在披碱草和老芒麦鲜牧草上共分离得到15株乳酸菌,通过形态学,生理生化指标及碳水化合物发酵实验进行筛选、鉴定,最终选择2株过氧化氢酶阴性,产酸迅速,无运动性,可在广泛的温度范围内生长,可以迅速有效的利用各种碳水化合物的优良同型发酵乳酸菌,一株为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)S2409,一株为蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtti)S1518。这两株乳酸菌繁殖迅速,在接种后2小时即可进入对数分裂期,最高活菌数接近1010cfu/ml培养液。这些特性对促进作物的乳酸发酵均具有良好的效果。应用分离得到的植物乳杆菌和蒙氏肠球菌作为青贮添加剂,进行披碱草和老芒麦混合牧草青贮发酵特性的研究。试验共分4个处理:对照组(Con),喷洒等量的水;S1518球菌组(Em);S2409杆菌组(Lp);S1518+S2409组(EL)。每处理设8个重复。由实验结果可知,添加乳酸菌可以明显降低青贮pH(p<0.05);明显增加乳酸含量(p<0.05),其中EL组增加效果更显著(p<0.01);丙酸及丁酸的含量明显下降(p<0.05);EL组显著降低青贮中NH3-N含量(p<0.05),Em、Lp组也有降低的趋势,但差异不显著(p>0.05);添加乳酸菌可以降低青贮DM的损失量,Em、Lp以及EL组DM的损失量分别降低0.98、1.32、0.6个百分点;此外调制成青贮可以较好的保存牧草中的β-胡萝卜素含量,但添加组的保存效果低于对照组(p<0.05)。添加乳酸菌可以促进青贮发酵初期迅速的乳酸菌增殖,抑制霉菌和丁酸菌的生长,从整个试验期来看, EL组效果更显著,但对酵母菌没有太大的影响。因此添加乳酸菌可以改善试验牧草青贮发酵品质, EL组对试验牧草青贮品质改善效果最优。应用分离得到的植物乳杆菌和蒙氏肠球菌作为添加剂进行中等规模的无芒雀麦田间青贮生产,进行西门塔尔牛饲喂试验。结果表明,在西门塔尔牛日粮中添加含乳酸菌的无芒雀麦青贮,与饲喂干草的西门塔尔牛组相比可以明显增加DMI(p<0.05),分别为16.71,14.28 kg/d;可以增加乳产量0.52kg/d(p<0.1),明显提高乳中总固形物(p<0.05)以及乳脂肪含量(p<0.05);但对乳蛋白(p>0.05),非脂固形物(p>0.05),乳糖(p>0.05)及酪蛋白(p>0.05)含量均无明显影响;此外干草组和青贮组提供的β-胡萝卜素均可以满足家畜对VA的需求,分别为42.20ug/dl和43.87ug/dl;但是在以无芒雀麦青贮和干草为主要粗饲料来源时,需要额外补充维生素E。补饲LAB添加剂青贮,西门塔尔牛粪中乳酸菌(p<0.1),肠球菌的数量有增加的趋势(p<0.1),大肠杆菌数量呈下降趋势(p<0.1),对一般细菌的数量基本无影响(p>0.05)。综上所述,饲喂添加植物乳杆菌和蒙氏肠球菌的无芒雀麦青贮可以提高西门塔尔牛的生产性能。
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