目的:利用大鼠心肌细胞缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）模型模拟在体心肌缺血再灌注,观察益气活血方对心肌缺血再灌注损伤的干预作用,检测microRNA-1、MAPK3等表达水平,探讨益气活血方的作用机制。方法:实验一:利用成年大鼠心肌细胞,采用随机数字表法将心肌细胞分为3组:空白组（C）、模型组（M）、益气活血方组（YH）。将模型组（M）、益气活血方组（YH）置入缺氧小室干预3 h,随后打开缺氧小室,将细胞转移至37℃、5%CO2的细胞恒温培养箱,正常培养0.5 h后进行各种检测。1.心肌损伤程度检测:通过比色法检测细胞培养基中LDH释放量;通过紫外分光光度法检测细胞中CK活性;2.凋亡指标检测:q RT-PCR法检测Bax、Bcl-2 m RNA表达变化;Western Blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达变化;3.信号通路检测:q RT-PCR法检测microRNA-1表达变化,Western Blot法检测MAPK3蛋白磷酸化表达变化。实验二:利用H9c2细胞,验证实验一实验结论,并利用microRNA-1模拟物转染H9c2细胞,采用随机数字表法将心肌细胞分为4组:模型组（M）、模型+转染组（T）、模型+益气活血方组（YH）、模型+转染+益气活血方组（T+YH）。将4组心肌细胞放入缺氧小室干预3 h,随后打开缺氧小室,将细胞转移至37℃、5%CO2的细胞恒温培养箱,正常培养0.5 h后进行各种检测。1.心肌损伤程度检测:通过比色法检测细胞培养基中LDH释放量;2.凋亡指标检测:q RT-PCR法检测Bax、Bcl-2 m RNA表达变化;Western Blot法检测Bax、Bcl2蛋白表达变化;3.信号通路检测:q RT-PCR法检测microRNA-1表达变化,Western Blot法检测MAPK3蛋白磷酸化表达变化。结果:1.成年大鼠心肌细胞H/R实验中,与C组相比,M组LDH释放量明显增加,CK活性明显升高,m RNA Bax/Bcl-2比率明显增加,蛋白Bax/Bcl-2比率明显增加,差异有统计学意义（P<0.01）。与M组相比,YH组LDH释放量明显降低,CK活性明显下降,m RNA Bax/Bcl-2比率明显下降,YH组蛋白Bax/Bcl-2比率下降,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。2.成年大鼠心肌细胞H/R实验中,与C组相比,M组microRNA-1表达明显增加,MAPK3磷酸化水平明显提高,差异有统计学意义（P<0.01）;与M组相比,YH组microRNA-1表达下降,MAPK3磷酸化水平明显降低,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。3.H9c2心肌细胞H/R实验中,与C组相比,M组LDH释放量增加,m RNA Bax/Bcl-2比率明显增加,蛋白Bax/Bcl-2比率表达明显增加,差异有统计学意义（P<0.01）。与M组相比,YH组LDH释放量明显降低,m RNA Bax/Bcl-2比率明显下降,蛋白Bax/Bcl-2比率明显下降,差异有统计学意义（P<0.01）。4.H9c2心肌细胞H/R实验中,与C组相比,M组mi RNA-1表达明显增加,MAPK3蛋白磷酸化水平明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与M组相比,YH组microRNA-1表达下降,MAPK3蛋白磷酸化水平明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）。5.利用microRNA-1模拟物转染H9c2心肌细胞,与M组相比,YH组Bax/Bcl-2m RNA及蛋白比率明显降低,T组Bax/Bcl-2 m RNA及蛋白比率明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）。与YH组相比,T组Bax/Bcl-2 m RNA及蛋白比率明显升高,YH+T组Bax/Bcl-2 m RNA及蛋白比率明显升高,差异有统计学意义（P<0.01）。与T组相比,YH+T组Bax/Bcl-2 m RNA及蛋白比率明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）6.利用microRNA-1模拟物转染H9c2心肌细胞中,与M组相比,YH组MAPK3蛋白磷酸化水平明显降低,T组MAPK3蛋白磷酸化水平升高,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;与YH组相比,T组MAPK3蛋白磷酸化水平明显升高,YH+T组MAPK3蛋白磷酸化水平升高,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）;与T组相比,YH+T组MAPK3蛋白磷酸化水平比率明显降低,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:1.益气活血方对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用;2.microRNA-1通过靶向MAPK3调控心肌缺血再灌注损伤;3.益气活血方通过microRNA-1调控MAPK3发挥抗心肌缺血再灌注损伤作用。