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海洋红酵母是海洋中存在的一种单细胞酵母品系,富含丰富的蛋白质、不饱和脂肪酸、必需氨基酸,代谢过程中可产生类胡萝卜素、消化酶、维生素、糖类、油脂等多种活性物质。本文从雷州半岛近岸海域采集样品进行红酵母的分离鉴定,对分离菌进行了多样性分析及代谢产物研究,以期为动物用红酵母益生素的开发与应用提供试验数据和奠定基础。从雷州半岛近岸海域采集海洋生物、海水、海泥等样品,共计317份;将样品处理后先富集培养,再用改良的酵母菌琼脂培养基平板及麦芽汁琼脂培养基平板进行分离培养和纯培养;对分离菌株通过菌体形态特性、培养特性及生理生化试验结果进行初步鉴定;对初步鉴定的红酵母选取有代表性的菌株作26s rDNA D1/D2区域序列分析,构建系统发育树,并进行多样性分析。结果表明,从317份样品中分离和初步鉴定出71株海洋红酵母;其中,有代表性的36株海洋红酵母归属于5个种和2个疑似新种;36株代表菌中有胶红酵母22株、粘红酵母6株、红冬孢酵母3株、斯鲁菲亚红酵母2株、浅红红酵母1株和疑似红酵母新种2株;疑似新种命名为Rhodotorula.Sp.Nov.cZDJ2和Rhodotorula.Sp.Nov.ZTC2。用酸热法、二甲基亚砜(DMSO)法、乳酸提取法和研磨冻融法分别处理71株海洋红酵母细胞壁;用分光光度计法定量测定提取液中的类胡萝卜素含量及定性检测虾青素含量;用高效液相色谱仪定量测定筛选出的高产虾青素菌株的提取液。结果表明,酸热法对于海洋红酵母中类胡萝卜素及虾青素的提取效果最好,其次是DMSO法;DMSO法简便易行,适宜于高产类胡萝卜素菌株的筛选;71株海洋红酵母产类胡萝卜素的含量范围在54.127μg/g~608.428μg/g之间,其中胶红酵母ZZC1类胡萝卜素产量最高,为608.428μg/g;胶红酵母ZTHY2虾青素产量最高,为11.641μg/mL。用水解酪蛋白、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)及淀粉形成透明圈法对71株海洋红酵母产生的蛋白酶、纤维素酶及淀粉酶活力进行初筛;用Folin法、CMC糖化力法、3,5-二硝基水杨酸法及对硝基苯酚法对产酶菌株进行复筛。结果表明,71株海洋红酵母中,有11株产生蛋白酶、16株产生纤维素酶、33株产生淀粉酶及71株产生脂肪酶;胶红酵母ZTHG5产蛋白酶活力最高,为491.520 U;胶红酵母aZDD6产纤维素酶活力最高,为15.00 U;胶红酵母ZDHN1产淀粉酶活力最高,为7.530MMU,胶红酵母ZTHY1产脂肪酶活力最高,为6.209 U。用维生素B1、维生素B2和维生素B6标准品绘制标准曲线,通过紫外分光光度计法测定71株海洋红酵母中维生素B1、维生素B6含量,通过可见分光光度计法测定71株海洋红酵母中维生素B2含量。结果表明,71株海洋红酵母均产生维生素B1、维生素B2和维生素B6;其中,胶红酵母cZDY2产生的维生素B1含量最高,为13.128μg/mL;胶红酵母aZDY2产生的维生素B2含量最高,为14.711μg/mL;胶红酵母cZDD1产生的维生素B6含量最高,为9.660μg/mL。选用大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鸡白痢沙门菌和枯草芽孢杆菌作为指示菌,用滤纸片浸泡发酵液粘贴平板法对71株海洋红酵母进行抑菌活性试验。71株红酵母中有8株菌产生抑菌活性物质,分别是胶红酵母2株、斯鲁菲亚红酵母3株、浅红红酵母1株和疑似红酵母新种2株,最大抑菌圈直径仅为8.5 mm,抑菌活性作用较弱。本研究从雷州半岛近岸海域海洋生物及环境中分离鉴定出71株海洋红酵母,其中胶红酵母、粘红酵母为优势种群;筛选出了高产类胡萝卜素、虾青素、蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶、维生素B1、维生素B2和维生素B6的菌株,但不易产生抑菌活性物质。