七氟醚麻醉对成年大鼠认知功能及中枢乙酰胆碱能受体表达的影响

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目的:观察七氟醚麻醉对成年大鼠认知功能及海马神经元α4、β2、α3、α7乙酰胆碱能受体(n Ach R)表达的影响。方法:健康清洁级SD大鼠144只,雌雄各半,鼠龄34个月,体重220270 g,采用随机数字表法分为4组(n=36):对照组(C组)、七氟醚麻醉1 h组(S1组)、七氟醚麻醉3 h组(S2组)和七氟醚麻醉5 h组(S3组)。C组吸入空气,S1组、S2组和S3组分别吸入3%七氟醚1、3和5 h。麻醉前每组大鼠完成为期5d的定位航行实验;麻醉后1d、麻醉后7d,每组分别取12只大鼠进行空间探索实验。于麻醉结束后即刻、麻醉后1 d和麻醉后7 d,每组分别取12只大鼠处死,取海马组织。采用Morris水迷宫实验进行行为学测试并记录逃避潜伏期、目标象限持续时间、目标象限路程、总路程、穿越平台次数,计算原平台所在象限时间占总时间比、原平台所在象限路程占总路程比。采用Western blot法和免疫组化检测海马神经元α4、β2、α3、α7 nAchR蛋白的表达,采用qPCR法检测α4、β2、α3、α7 nAchR mRNA的表达。结果:与C组比较,S1组、S2组和S3组逃避潜伏期无明显延长(P>0.05),S1组、S2组和S3组目标象限停留时间缩短,原平台所在象限时间比值和原平台所在象限游泳路程比值降低,S3组麻醉后1d目标象限路程缩短,α4、β2、α7nAchR蛋白及其mRNA表达下调,海马α4 nAchR阳性细胞数减少,α3 nAchR蛋白表达下调,S2组、S3组麻醉后7d时α3 nAchR mRNA表达下调(P<0.05);与S1组和S2组比较,S3组麻醉后1d时目标象限停留时间缩短,原平台所在象限时间比值和原平台所在象限游泳路程比值降低(P<0.05);与S1组比较,S3组麻醉结束后即刻α7nAchR蛋白表达下调,S2组和S3组麻醉后7d时α3 nAchR mRNA表达下调(P<0.05)。结论:吸入3%七氟醚麻醉1h、3h、5h均可导致大鼠认知功能减退,且吸入七氟醚麻醉5h在麻醉后1d大鼠认知功能减退更为显著,这可能与α4、β2、α3、α7 n Ach R蛋白和m RNA表达下调有关。
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