扩张蛋白是一类细胞壁酶蛋白，能够通过打断细胞壁多聚物之间的氢键，诱导酸依赖的细胞壁延展和压力松弛，其主要由两类多基因家族编码，分别命名为α-expansin、β-expansin，每类扩张蛋白基因家族又有很多的基因成员。扩张蛋白己在不同的种属植物中被鉴定存在，并且大量的扩张蛋白基因被克隆。研究表明：每一个扩张蛋白基因在高度特定的位点和高度特定的细胞类型中表达，其表达在时间、空间上受到严格的调控且受到激素和环境因子的调控。目前认为扩张蛋白几乎参与了植物的整个发育过程：除具有增大细胞的功能外，扩张蛋白在细胞生长、种子萌发、根毛形成、根系生长、叶原基形成、叶子生长发育、果实成熟、器官脱离，以及花粉管生长方面均起着重要的作用。 本实验首次从蜡梅的cDNA文库中获得了expansin基因，命名为Cpexpl，并对其进行了序列分析和功能预测，以及构建了Cpexpl的表达载体，其主要研究如下： 1．克隆子的获得 在文库中随机挑选克隆，提取质粒DNA，以文库克隆子质粒为模板，利用EST序列DW222744特异引物扩增出预计大小(363bp)的特异片段，以文库克隆载体pTriplEx2引物扩增出约1200bp的特异片段，符合cDNA序列至少应该大于750个核苷酸的预期，初步推测从文库中获得的CH186的克隆子代表的基因为EST序列DW222744对应的全长cDNA。 2．序列分析 对目标基因进行了序列分析，发现该基因由1152个核苷酸组成，包含一个630个核苷酸的ORF，编码蛋白长209个氨基酸。该蛋白理论分子量为22.9kD，预测等电点为9.46。使用blastn和blastp比对发现目标克隆子的EST序列与排在第一位的与核苷酸比对的结果接近的是大豆中的扩张蛋白Glycine max，Identities达85％。 3．蛋白质性质分析