金钗石斛乙酸乙酯部位抗氧化活性的物质基础研究

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目的:对兰科石斛属植物金钗石斛的乙酸乙酯部位的化学成分展开系统的研究,并从中筛选出具有抗氧化活性的单体化合物。方法:?对金钗石斛95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶色谱、凝胶色谱以及重结晶等技术进行分离纯化,并根据其理化性质、波谱数据鉴定化合物的结构;?采用UPLC C18(100mm×2.1mm,1.6μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱;流速0.4 mL/min;柱温30℃。质谱分析采用电喷雾(ESI)离子源,独立数据采集(ID A)、正负离子模式下分别采集数据。针对保留时间、测得的精确相对分子质量,应用MassHunter软件Formula Calculator等功能、天然产物数据库,分析比较各色谱峰的一级二级质谱裂解碎片。?用L-谷氨酸钠诱导人视网膜细胞MIO-M1细胞氧化损伤,对部分金钗石斛乙酸乙酯部分分离得到的化合物进行体外抗氧化活性筛选,并通过MTT法检测存活率。结果:?从金钗石斛乙酸乙酯部分分离得到了16个化合物,根据波谱数据进行结构鉴定,它们分别为:coumarin(XJ-1),E-ferulic acid hexacosyl ester(XJ-2),dengibsinin(XJ-3),trans-tetradecyl 3-(4-hydroxyphenyl)propenoate(XJ-4),nobilone(XJ-5),densiflorol B(XJ-6),cypriped-in(XJ-7),naringenin(XJ-8),(E)-4-(2-methoxyvinyl)benzene-1,2-diol(XJ-9),mo-scatin(XJ-10),moellendorffiline(XJ-11),isopimpinellin(XJ-12),denchrysan A(XJ-13),2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(XJ-14),dengibsin(XJ-15),2,4,8-tri-methoxy phenanthrene-3,7-diol(XJ-16);?从金钗石斛的乙酸乙酯萃取部位共鉴定了45个化合物,其主要化学成分包括生物碱类、联苄类、菲类、倍半萜类等。?化合物XJ-1、XJ-4和XJ-7在一定浓度下对视网膜细胞MIO-M1有一定的抗氧化活性,化合物XJ-3、XJ-6、XJ-7、XJ-10、XJ-13、XJ-15和XJ-16在不同浓度下会抑制细胞的存活率。结论:?本实验进一步丰富了金钗石斛在化学成分上的研究;?该方法准确、可靠,适用于金钗石斛药材中化学成分的鉴定研究,为金钗石斛中的药效物质基础、资源开发利用提供参考;?本部分对金钗石斛的抗氧化活性展开了初步的研究,为金钗石斛在药理活性的研究提供了依据。
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