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目的:生存素(survivin)是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在大多数恶性肿瘤组织中丰富表达,而在成人正常终末分化组织中不表达。这说明survivin在肿瘤发生中具有重要作用。本实验探讨survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用,进而探讨survivin反义寡核苷酸抑制人胃癌细胞恶性增殖和诱导凋亡中的作用机制及其在胃癌临床治疗中可能的应用前景,进一步为靶向survivin在胃癌中的治疗提供依据,为胃癌的治疗和预防开辟新的思路和途径。
方法:设计合成特异性靶向生存素的反义寡核苷酸。胃癌细胞株SGC7901分为4组:空白细胞对照组(Sham)、单纯脂质体对照组(Lip)、正义链转染对照组(Lip-SODN)、ASODN转染组(Lip-ASODN),作用48h后收获各组细胞。①Western blot法检测各组细胞survivin表达情况;②流式细胞仪检测各组细胞凋亡率:③MTT法检测各组细胞的生长抑制率;④免疫组化SP法检测细胞中PCNA的表达水平。
结果:①脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染后的胃癌细胞出现survivin蛋白表达明显下降;②ASODN转染组细胞凋亡率(AR)明显高于各对照组(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05);③ASODN转染组细胞的生长抑制率(IR)明显高于各对照组(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05);④免疫组化SP法染色显示转染ASODN后,SGC7901细胞中PCNA表达水平明显降低。
结论:survivin反义寡核苷酸转染胃癌细胞能下调survivin蛋白表达,诱导胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,具有明显的抗癌作用。