【摘 要】
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目的:通过研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠模型和临床患者中葡萄糖代谢有氧途径中糖酵解、三羧酸循环与正常对照之间的差异,分析帕金森病对葡萄糖代谢途径有无影响,从而进一步为帕金森病诊治提供新思路。方法:选取20只雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只:A.对照组(生理盐水腹腔注射7天);B.PD模型组(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶腹腔注射7天)。
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目的:通过研究帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠模型和临床患者中葡萄糖代谢有氧途径中糖酵解、三羧酸循环与正常对照之间的差异,分析帕金森病对葡萄糖代谢途径有无影响,从而进一步为帕金森病诊治提供新思路。方法:选取20只雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只:A.对照组(生理盐水腹腔注射7天);B.PD模型组(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶腹腔注射7天)。收集帕金森病患者、正常志愿者血清标本各10例,将小鼠脑组织、临床受试者血清提取RNA反转录后进行聚合酶链式反应实验比较糖代谢有氧途径中关键酶表达差异,行中心碳代谢实验比较糖代谢有氧途径中的中间产物差异,记录数值并进行统计学分析。结果:在小鼠模型中,PD组脑组织中己糖激酶2(hexokinase 2,HK2)、6磷酸果糖激酶1(6-phosphofructokinase1,PFK 1)、α-酮戊二酸脱氢酶复合体(α-ketoglutarate dehydrogenase complex,OGDH)、柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)在mRNA水平上较对照组增高且差异有统计学意义(HK2、CS表达差异中P<0.05,PFK1、OGDH表达差异P<0.01),糖酵解过程中的代谢物6-磷酸葡萄糖(Glucose 6-phosphate,G6P)、6-磷酸果糖(Fructose-6-phosphate,F6P)、丙酮酸(Pyruvate)、和TCA循环产物α-酮戊二酸(2-Ketoglutaric acid,2KGA)、琥珀酸(Succinic Acid,Succinate)在PD组小鼠中显著降低,3-磷酸甘油酸(3-phosphoglycerate,G3P)较对照组稍升高,PD模型中葡萄糖代谢糖酵解及三羧酸循环受到抑制;在临床患者中发现,在PD患者血清中葡萄糖代谢有氧途径关键酶中的HK2在mRNA水平上表达较对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而CS在mRNA水平上表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05),G6P、F6P、丙酮酸、2KGA、琥珀酸、富马酸(Fumarate)、苹果酸(Maleic acid,Maleate)较对照组明显升高,中间产物累积,PD患者血清中葡萄糖代谢中糖酵解活跃,三羧酸循环下调。结论:小鼠模型中,我们发现PD脑组织中葡萄糖代谢糖酵解、三羧酸循环产物降低,关键酶的表达升高,整体脑组织中葡萄糖代谢下调,其中代谢变化中关键酶变化为HK2、PFK1、OGDH、CS表达的升高,而在人的样本中发现整体葡萄糖代谢产物累积,葡萄糖关键酶的表达HK2降低,CS表达升高,糖酵解过程活跃,三羧酸循环过程缓慢。总之,帕金森病糖酵解及三羧酸循环中关键酶的变化主要集中在HK2、CS。
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