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液相色谱-电化学联用技术(HPLC-ECD)在多组分复杂样品分析中是一个有趣的实用技术,它将高效液相色谱(HPLC)的高分离效能和电化学检测(ECD)的高灵敏性和高选择性相结合,较好的实现了高效分离和高灵敏度检测。本论文采用HPLC-ECD及HPLC-MS联用技术,建立了几种中药和生物样品中活性成分的分析新方法；扩展了液相色谱和电分析化学的应用范围,具有较好的理论和应用价值。具体研究内容如下：1.采用超声提取法对中药材汉防己中的汉防己甲素和汉防己乙素进行有效提取,并应用HPLC-ECD技术对两种生物碱进行了分离检测。该方法灵敏度高,操作简单易行,分析结果准确可靠,可应用于汉防己中防己生物碱的检测。分析结果显示,汉防己甲素和汉防己乙素的浓度分别在1.3×10-6～1.07×10-4mol/L和1.4×10-6～1.09×10-4mol/L范围内和峰面积有良好的线性关系；二种生物碱的检测限分别达到了2.6×10-7mol/L和2.7×10-7mol/L,检测灵敏度比同等条件下紫外检测提高一个数量级；回收率均在95%-105%之间；测得汉防己中汉防己甲、乙素的百分含量分别为0.781%和0.401%。实验采用LC-ESI-MS方法验证了建立的HPLC-ECD方法的准确性。2.建立了一种稳定性好、灵敏度高的中药黄连中四种生物碱的同时检测的液相色谱-电化学检测方法,并成功应用于大鼠血浆样品中对四种生物碱的分析。采用该方法测定四种生物碱的检测限在1.0×10-8mol/L到3.0×10-8mol/L,与文献LC-UV方法相比较,小檗碱的检测灵敏度提高了了80倍,并且克服了LC-UV方法难以对具有不同最大吸收波长的多种化合物进行同时灵敏检测的缺陷。采用流动注射分析法,比较了小檗碱样品在电化学检测器与商品化的紫外检测器检测时在重复性方面的差异性,结果显示两种检测器无显著性差异。3.采用碳纳米管作为电极修饰材料,制备了一种稳定性好、灵敏度高的电极,分别考察了犬尿氨酸和色氨酸在该修饰电极上的电化学行为,将该修饰电极应用于HPLC-ECD中,实现了人类血浆样品中对犬尿氨酸和色氨酸的分析。分析结果显示,犬尿氨酸和色氨酸的浓度分别在1.0×10-6-8.0×10-5mol/L和8.0×10-7～1.6×10-4mol/L范围内和峰面积有良好的线性关系；两种氨基酸的检测限分别达到了5.0×10-7mol/L和4.0×10-7mol/L,与同等条件下采用裸玻碳电极检测比较检测灵敏度提高3-5倍。采用该方法,测得正常人血浆样品中犬尿氨酸和色氨酸浓度分别为1.4×10-6mol/L和4.78×10-5mol/L。实验采用LC-UV和LC-MS技术验证了该方法的准确性。该方法回收率为84.8%-110%,精密度RSD值小于5.9%。4.建立了一种LC-MS方法分离鉴定氨基酸组成相同序列不同的多肽。以具有这种结构特点的两种小分子三肽为模式分子,考察了方法的准确度和重现性。该方法的建立对蛋白质组学研究具有一定的参考价值,既对生物体存在的结构上具有氨基酸组成相同序列不同的多肽和蛋白质建立一种可靠的分离分析方法提供了参考,又为化学合成多肽粗产品纯度评估及副产物监控提供有效的分析方法。