肾气丸对缺血再灌注损伤的小鼠肾细胞凋亡的作用及机制研究

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目的:探讨肾气丸在小鼠I/R诱导的急性肾损伤中的作用及机制,为该药物在临床的应用提供参考依据。方法:健康雄性C57BL6小鼠40只,利用随机数字表法分为4组(每组10只):(1)假手术组(Sham);(2)肾缺血再灌注组(肾I/R组);(3)肾气丸低剂量组(10.5g/kg/d);(4)肾气丸高剂量组(21.0g/kg/d)。分组后肾气丸低剂量组给予10.5g/kg/d的肾气丸灌胃,肾气丸高剂量组给予21.0g/kg/d的肾气丸灌胃,持续2周;假手术组和肾I/R组每天给予等量生理盐水灌胃。2周后构建肾I/R损伤模型,24h处死小鼠并取材。检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及肾脏组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;HE染色及TUNEL染色检测肾组织损伤及凋亡水平;PCR及免疫组化检测Bcl-2、Caspase-3表达水平;Western blot法检测PI3K和AKT蛋白表达水平。结果:HE及TUNEL染色表明,肾气丸可抑制细胞损伤及凋亡。与假手术组比较,肾I/R组Scr、BUN、MDA含量、Caspase-3水平均升高(P<0.05),SOD活性、Bcl-2水平、PI3K和AKT蛋白表达明显下降(P<0.05);与肾I/R组比较,肾气丸组(低剂量组和高剂量组)Scr、BUN和MDA含量、Caspase-3水平均降低(P<0.05),而SOD活性、Bcl-2水平、PI3K和AKT蛋白表达升高(P<0.05);与肾气丸低剂量组比较,肾气丸组高剂量组Scr、BUN和MDA含量、Caspase-3水平均降低(P<0.05),SOD活性、Bcl-2水平、PI3K和AKT蛋白表达均升高(P<0.05)。结论:肾气丸可通过激活PI3K/AKT信号通路对小鼠I/R诱导的急性肾损伤起保护作用。
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