论文部分内容阅读
海产贝类胚胎和幼虫在海水中发育,此时以血淋巴为基础的防御机制还未形成或刚开始发生,化学防御和分子保护系统是保证海产贝类早期发育阶段能够存活的重要的决定性因素。对影响海产贝类早期发育阶段存活因子特别是化学因子的深入了解,有助于我们在经济贝类人工育苗过程中采取措施预防病害的发生,提高贝苗成活率。本文采用组织化学和分光光度技术对贻贝(Mytilus edulis)卵、胚胎和早期幼虫酯酶(Esterase, EST)、过氧化物酶(Peroxidase, POD)、酸性磷酸酶(Acid phosphatase, ACP)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, AKP)活性进行了定位和定量研究,以探讨贝类早期发育过程中的免疫防御机制。结果表明,EST、POD、ACP和AKP均存在于贻贝的卵母细胞、胚胎和幼虫中,但在各个发育时期的分布和含量不同。组织化学显示,从卵母细胞到D型面盘幼虫各个发育时期的胚胎和幼虫均呈EST强阳性和POD阳性;卵母细胞核区较大且颜色较浅;桑椹期开始不同细胞阳性的强弱出现差异;原肠胚、担轮幼虫和D型面盘幼虫细胞间阳性强弱的差异逐步增大。组织化学还显示从卵细胞到D型面盘幼虫各个时期都呈ACP和AKP阳性,卵细胞中阳性颗粒较大且分布比较均匀,受精卵中央着色较深,卵裂期核区呈强阳性且大分裂球内阳性颗粒较多,原肠胚和担轮幼虫外层细胞阳性较强,面盘幼虫外套膜边缘膜、内脏团和面盘基部呈强阳性。分光光度测定结果表明,α-醋酸酯酶活力,在卵母细胞最低,受精卵略有提高,卵裂期胚胎提高较大达到最高峰,囊胚、原肠胚和担轮幼虫又逐渐下降,D型面盘幼虫下降较大。α-丁酸酯酶活力,卵母细胞较高,受精卵略有提高达到最高峰,卵裂期胚胎到D型面盘幼虫各个时期逐渐下降,D型面盘幼虫最低。不依赖卤素POD活力,卵细胞最低,受精卵提高较大,囊胚期达到最高峰,原肠胚、担轮幼虫和D型面盘幼虫逐渐降低。依赖卤素POD活力与不依赖卤素POD活力的变化规律相似,但受精卵提高较小,而卵裂期提高较大。生化测定ACP和AKP活力,均是卵细胞最低,随着发育酶活力逐步提高,其中ACP活力在受精后和囊胚期明显提高,囊胚期达到最高峰,其后又略有下降;AKP活力在卵裂期、担轮幼虫和面盘幼虫提高较大,面盘幼虫期酶活力最高。EST、POD、ACP和AKP均部分来自母体,受精作用促进了酶的产生。EST、POD、ACP和AKP在贻贝的发育早期抵抗病原生物侵染方面可能发挥重要作用。