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目的：探讨盐霉素诱导前列腺癌 PC-3细胞自噬及可能机制，为临床应用盐霉素治疗前列腺癌提供实验依据。 材料与方法：①不同浓度盐霉素处理对数生长期前列腺癌 PC-3细胞，透射电镜观察自噬体及其他超微结构，免疫荧光检测 LC-3 II的表达，Western-Blot法检测细胞自噬相关蛋白LC-3 II、P62、Beclin-1、Atg3、Atg9的表达。②盐霉素处理对数生长期前列腺癌PC-3细胞不同时间，Western-Blot法检测细胞自噬相关蛋白LC-3 II、P62、Beclin-1、Atg3、Atg9的表达。③应用转染技术将pcDNA3.1-GFP-LC3质粒导入前列腺癌PC-3细胞，不同浓度盐霉素处理后，荧光显微镜观测GFP-LC3融合蛋白的表达。④统计学方法：实验数据均使用x—±s表示，采用graphPad prism软件及SPSS19.0统计分析软件统计学分析，实验组与对照组的比较使用t检验，两组以上数据比较使用方差分析。 结果：①透射电镜观察自噬体：空白对照组未出现自噬体及自噬泡，1、2μmol/L盐霉素处理组出现大量自噬体和自噬泡，且2μmol/L处理组较1μmol/L处理组的自噬体数量增多；②免疫荧光检测LC-3 II的表达：空白对照组中红色荧光标记的自噬标志蛋白LC-3 II表达较弱，2、5μmol/L处理组 LC-3 II荧光强度较对照组逐渐增强，且以5μmol/L处理组荧光强度最强。③Western-Blot法检测细胞自噬相关蛋白的表达：经0.25、0.5、1、2、5μmol/L盐霉素处理PC-3细胞24h后引起的细胞自噬标志蛋白 LC-3Ⅱ表达显著增强，P62蛋白表达减弱，Beclin-1、Atg3表达增强，与对照组比较有统计学差异（p<0.05），各处理组间比较差异具有统计学意义（p<0.05）；而 Atg9的表达随着药物浓度的增加，各处理组较空白对照组表达增强，有统计学差异(p<0.05)，但各处理组之间表达不呈规律性变化。经2μmol/L盐霉素处理PC-3细胞4、6、8、12、24h后引起的细胞自噬标志蛋白LC-3Ⅱ表达显著增强，P62蛋白达减弱，Beclin-1、Atg3表达增强，与对照组比较有统计学差异（p<0.05），各处理组间比较差异具有统计学意义（p<0.05）。而 Atg9的表达随着盐霉素作用时间的增加，各处理组较空白对照组表达增强，有统计学差异，但各处理组之间表达不呈规律性变化。④荧光显微镜观测GFP-LC3融合蛋白：空白对照组的GFP-LC3融合蛋白弥散在细胞浆中，很少形成标记自噬体的荧光斑点，视野中单个细胞平均斑点计数为6个，说明自噬体形成少；1、2、5μmol/L处理组可观察到荧光斑点的形成，视野单个细胞平均斑点计数分别为28、54、86个，实验组与对照组、实验组之间均有统计学差异（p<0.05），说明在一定范围内，随着盐霉素药物浓度逐渐增加，倒置荧光显微镜下荧光斑点数量逐渐增多，以盐霉素5μmol/L组荧光斑点数量最多。 结论：①盐霉素能诱导前列腺癌PC-3细胞发生自噬，其诱导自噬的强度与药物浓度、作用时间成正相关。②盐霉素诱导前列腺癌PC-3细胞发生自噬的机制可能与上调自噬基因Beclin-1、Atg3的表达有关。