[目的]心肌梗死是目前慢性心力衰竭发生的主要病因之一,心梗后心室重构是心力衰竭发展的主要病理机制。本研究拟采用大鼠急性心梗模型,应用差异蛋白质组学方法,通过研究心梗后心室重构早期的梗死周围区心肌组织的蛋白表达变化,探索心梗后心室重构这一病理过程的分子调控机制。[方法和结果]本研究首先通过呼吸机支持和胸腔内原位缝扎冠状动脉的方法成功的制作了大鼠急性心梗模型。然后通过动态观察急性心梗后大鼠心脏的形态学和组织学变化,发现心梗后的梗死周围区组织学变化具有明显的时间窗：心梗后1天,开始出现急性炎症反应,表现为中性粒细胞的大量浸润,同时梗死周围区的心肌细胞出现细胞凋亡改变；心梗后4天,梗死周围区出现慢性炎症细胞浸润,新生肉芽组织形成,伴大量血管新生和纤维母细胞增生；心梗后10天,梗死周围区主要表现为纤维化改变。由此我们将心梗后心室重构早期划分为以下三期：炎症期,增殖期和成熟期,并确定由心梗后1天、4天和10天作为代表此三期的时间点。接下来,我们利用基于二维凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱的差异蛋白质组学技术平台,鉴定了大鼠梗死周围区心肌组织在心梗前后四个时间点(心梗后0,1,4和10天)发生表达变化的蛋白。结果共鉴定出96个蛋白点,对应于69种蛋白,聚类分析显示这些蛋白的表达变化在心梗前后主要存在三组趋势,分别对应于心室重构早期的三个阶段。通过对这些蛋白进行生物信息学分析,我们发现这些蛋白可能参与了和心室重构相关的生物学事件,如缺血缺氧损伤、氧化应激反应、炎症反应和增殖反应等。最后我们从鉴定的蛋白列表中随机选择了cofilin-1,SNAP-29和prohibitin三个蛋白,分别通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR).免疫印迹(Western blot)和免疫组化的方法验证了蛋白质组学的研究结果,并对这三个早期重构相关功能蛋白在心梗后的定量和定位表达变化信息进行了初步研究。[结论]通过呼吸机支持和胸腔内原位结扎冠脉的方法制作大鼠急性心梗模型,稳定性好、成功率高,方法容易掌握,适合推广应用。大鼠急性心梗后梗死周围区的组织学变化具有明显的时间窗,心梗后1天、4天和10天可以代表心梗后早期心室重构的三个时期(炎症期,增殖期和成熟期)。本课题应用蛋白质组学方法研究了心梗后心室重构早期梗死周围区心肌组织中蛋白的表达变化,利用生物信息学方法分析了这些差异蛋白在早期重构相关生物学事件中可能的作用,为以后研究心室重构相关蛋白的功能、探索心梗后心室重构的分子调控机制、寻找具有临床治疗效应的抗心室重构分子靶标提供了良好的研究基础。