基于组学分析木豆根系代谢谱与磷酯酶基因表达谱对低磷胁迫的响应

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木豆(Cajanus cajan)是六大食用豆类中唯一的木本食用豆类作物,全球年产量约为449万吨,被广泛种植于世界热带与亚热带地区(FAO,2016)。木豆用途广泛,青籽粒可作为蔬菜;干熟籽粒可食用;叶片可作为饲料、绿肥,并具有药用价值。由于木豆的根系发达、固氮效率高,其耐干旱和耐贫瘠能力强,也用作植被恢复、水土保持、荒山绿化的先锋作物。已有的研究表明,木豆对缺磷酸性土壤具有较强适应能力,但其适应低磷胁迫的潜在机制仍不清楚。本研究以木豆ICPH2740为材料,利用代谢组学和转录组学技术,分析木豆根系对低磷胁迫的响应机制,主要研究结果如下:(1)低磷处理导致木豆的植株干重和全磷含量显著降低,但根系的抗氧化酶类(超氧化物歧化酶、过氧化物酶)活性和抗氧化物质(抗坏血酸、总酚、总类黄酮)含量显著提高,表明木豆通过提高抗氧化能力来抵抗低磷胁迫对根系的损伤。(2)木豆根系代谢组学分析共鉴定14类共558个代谢产物,其中正常供磷与低磷处理差异代谢物166个,主要属于核苷酸及其衍生物、脂质、氨基酸及其衍生物。(3)低磷胁迫导致木豆根系的含磷代谢物含量显著降低,包括20种磷脂质[即:13种溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)、5种溶血磷脂酰乙醇胺(LysoPE)、甘油-3-磷酸胆碱、2-氨基乙基磷酸酯];9种含磷的核苷酸及其衍生物(即:腺苷-3’-5’-环单磷酸、鸟苷3’,5’-环一磷酸、尿苷5’-二磷酸葡萄糖、黄素腺嘌呤二核苷酸、尿甘5’-二磷酸葡萄糖二钠盐、5-尿嘧啶核苷酸、尿苷二磷酸葡萄糖、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、腺苷5’-单磷酸);4种磷酸化糖(即:葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、核酮糖,5-磷酸)。其中甘油-3-磷酸胆碱、腺苷-3’-5’-环单磷酸和鸟苷3+,5’-环一磷酸在低磷胁迫下的相对含量显著降低20倍以上。(4)在木豆根系的转录组分析中鉴定15类共146个磷酯酶编码基因,其中紫色酸性磷酸酶(CcPAP)家族成员最多,达26个基因,且其中14个受低磷诱导上调表达。此外,参与磷脂质降解的相关磷酯酶基因家族:磷脂酶C(CcPLC)、磷脂酶D(CcPLD)、磷脂酸磷酸酶(CcPAH)、磷酸乙醇胺/胆碱磷酸酶(CcPECP)和甘油磷酸二酯酶(CcGDPD)分别有4、2、1、3和2个基因在低磷胁迫下增加表达;参与核苷酸降解的相关磷酯酶基因家族:核糖核酸酶T2(CcRNS)、核酸外切酶和核酸内切酶分别鉴定到2、4和3个受低磷诱导上调表达的编码基因;参与磷酸化糖类降解的相关磷酯酶基因家族:磷酸糖磷酸酶(CcSgpp)、蔗糖-6-磷酸磷酸酶(CcSPP)和可溶性无机焦磷酸酶(CcPPase)分别有1、1和2个基因受低磷诱导上调表达。综上所述,当遭受低磷逆境时,木豆通过增强磷酯酶相关编码基因的转录表达水平,促进体内含磷代谢物的再活化利用,从而提高木豆对低磷胁迫的适应能力。
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