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血管生成素样蛋白4（Angiopoietin-like protein 4,Angptpl4）自被发现以来,其在疾病中的作用得到越来越多的研究和重视。现已有研究表明Angpt14参与动脉粥样硬化的发生发展。但是其确切的作用机制仍不清楚。同样地,大量的研究表明氧化应激与心血管疾病密切相关,但其发挥作用的途径还需要进一步探究。随着研究的深入,氧化应激与炎症反应在动脉粥样硬疾病中所起的作用进一步被揭示,已经成为探究其发病机制及寻找新的治疗手段的研究重点。研究目的:本实验旨在探究过氧化氢（hydrogen peroxide,H2O2）对小鼠巨噬细胞株RAW264.7中血管生成素样蛋白4（Angptl4）水平的影响以及进一步探究参与H2O2调节Angpt14表达的可能机制。研究方法:1.选用小鼠来源的巨噬细胞株RAW264.7;2.将巨噬细胞接种至细胞培养板,待细胞稳定并且贴壁,将细胞分为12组。正常对照组,H2O2 刺激组（0.25mmol/L）,H2O2 刺激组（0.5mmol/L）,H2O2刺激组（0.25mmol/L）+ U0126（20mmol/L）,H2O2刺激组（0.5mmol/L）+U0126（20mmol/L）,U0126 抑制组（20mmol/L）,H2O2刺激组（0.25mmol/L）+ SB203580（40mmol/L）,H2O2刺激组（0.5mmol/L）+SB203580（40mmol/L）,SB203580 抑制组（40mmol/L）,H2O2 刺激组（0.25mmol/L）+SP600125（10mmol/L）,H2O2刺激组（0.5mmol/L）+SP600125（10mmol/L）,SP600125抑制组（10mmol/L）。3.收集各组细胞并提取蛋白;收集各组培养基。应用细胞免疫荧光法、Western Blot技术分别检测各组细胞中Angptl4的表达;应用ELISA法检测各组培养基中Angpt4的水平;应用Western Blot技术检测MAPKs通路磷酸化蛋白的表达量。实验结果:1.H2O2促进巨噬细胞RAW264.7中Angptl4的表达:研究发现不同浓度（0.25mmol/L、0.5mmol/L）的 H2O2刺激 RAW264.7 细胞 24 小时,可以促进巨噬细胞中Angpt14的表达,并且呈浓度依赖性（P<0.05）。2.H2O2激活巨噬细胞RAW264.7中MAPKs通路:研究发现给予RAW264.7细胞 H2O2（0.25mmol/L、0.5mmol/L）刺激 24h,细胞中的磷酸化 ERKl/2,p38 MAPK以及JNK通路蛋白表达均增加,且呈浓度依赖性（P<0.05）。3.ERK1/2,p38MAPK通路拮抗剂抑制H2O2对Angpt14表达的影响:分别在U0126（20mmol/L）和 SB203580（40mmol/L）预处理 90 分钟条件下,H2O2（0.25mmol/L、0.5mmol/L）+ U0126（20mmol/L）组和 H2O2（0.25mmol/L、0.5mmol/L）+ SB203580（20mmol/L）组中的 Angptl4 的表达量均较单纯H2O2刺激组（0.25mmol/L、0.5mmol/L）组明显减少（P<0.05）,而在 SP600125（lOmmol/L）预处理 30 分钟条件下,H2O2（0.25mmol/L、0.5mmol/L）+SP600125（10mmol/L）组和 H2O2刺激组（0.25mmol/L、0.5mmol/L）组相比无明显统计学差异（P>0.05）。结论及意义:1.H2O2可促进巨噬细胞中Angpt14的表达,并呈浓度依赖性。2.H2O2可激活巨噬细胞中的MAPKs通路,其中ERK1/2和p38 MAPK通路在H2O2调控的Angpt14表达中发挥关键作用。