拟南芥AT14A蛋白的功能研究

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxinyu322
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
AT14A是拟南芥中一个与动物整合素具有部分同源序列的功能未知的蛋白。整合素是动物细胞质膜上介导胞外基质一质膜一细胞骨架连续体的重要中间分子,调控了细胞间的相互粘附和细胞内外的信号转导。植物细胞与动物细胞的差别之一在于表面结构的不同。植物细胞表面的由多糖和少量的蛋白等构成的复杂网状结构——细胞壁与质膜、细胞骨架也构成了一个信号转导连续体系。AT14A蛋白氨基酸序列中有一段与整合素相似的保守序列,提示其可能作为细胞壁-质膜-细胞骨架连续体的中间成员参与了细胞内外的信号转导过程。本研究以拟南芥为试验材料,对AT14A蛋白与细胞壁组成之间的关系进行了研究,主要结果如下:1.采用农杆菌介导的转基因方法,将AT14A-GFP融合基因转至拟南芥野生型植株以及悬浮细胞中,获得了相应的转基因株系和悬浮细胞系。完整植物材料体系的建立为研究AT14A的功能创造了条件。在转AT14A-GFP融合基因植株叶片下表皮细胞和气孔保卫细胞膜部位出现了GFP的特异绿色荧光,验证了AT14A是一个膜蛋白。2.对三种AT14A相关基因型拟南芥细胞壁多糖组分的测定结果表明,过表达株系AT14A细胞壁的纤维素含量显著高于野生型和突变体;与野生型和过表达株系相比,缺失型突变体at14a细胞壁的果胶类物质含量显著增加;而过表达和突变体细胞壁葡聚糖的含量均比野生型有显著增加。以上结果表明,无论AT14A的过表达还是缺失,都会改变拟南芥植株细胞壁多糖组分的构成。3.改进了拟南芥植株细胞壁蛋白的提纯方法。对改进前后壁蛋白的提取效果比较分析表明,增加C18过柱和丙酮沉淀步骤,有助于细胞壁蛋白的纯化和减少损耗,并能有效提高电泳质量和重复率。4.对三种AT14A相关基因型拟南芥细胞壁蛋白双向电泳结果比较分析获得的16个差异蛋白点进行了MALDI-TOF-MS分析和数据库检索鉴定,共有11个目的蛋白质得到了鉴定,在9个具有确定功能的蛋白中有2个蛋白与细胞壁组成直接相关——木葡聚糖水解酶(XTH7)和ADP核糖基化因子(ARF)型小G蛋白的鸟苷交换因子(EMB30)。5.通过酵母双杂交的方法对与AT14A互作的蛋白进行了筛选,以AT14A-N端胞内序列为诱饵,在cDNA表达文库中筛选得到了一个可能与细胞壁相关的蛋白——TSK相关蛋白1(TSA1);而以AT14A-C端序列为诱饵筛选得到的4个与细胞壁代谢相关或参与抗逆过程相关的蛋白,其中的α-木糖甘酶更直接参与了木聚糖和木葡聚糖的代谢过程。总之,AT14A与细胞壁的组成有密切的关系,其很可能作为细胞壁-质膜-细胞骨架连续体的中间分子介导了细胞内外的信号转导过程。
其他文献
本文用fusion方法构造了双参数量子群Ur,s(Sln)的所有楔积模.尽管Benkart G.和Witherspoon S已经在文章[3]中构造了这类模最初的一些情况,要找到其不可约商模仍然是不容易的.
本论文从几何学和拓扑学的角度出发,将几何学中的多面体理论和拓扑学中的纽结理论应用到病毒衣壳结构和DNA多面体分子的理论研究中,通过建立新的DNA多面体纽结和链环的理论模
钾离子是植物生长发育必需的营养元素。钾离子吸收及其在植物组织器官中的分配以及钾离子在植物细胞内各个细胞器之间的运输都是由钾离子转运蛋白完成的。因此,研究钾离子转
本论文主要利用山路引理、临界点理论、环绕定理等理论为工具讨论非线性椭圆方程解的存在性问题.本文共分为四章,第一章绪论部分主要介绍了非线性椭圆方程的发展过程,研究现
随着人们对群论与组合设计相互联系的深入研究,我们己经得到了许多具有具体参数的2-(v,κ,λ)对称设计的自同构群.近年来,阶n≤25的对称设计的自同构群成为许多学者关注的焦
本文主要研究Delandtsheer猜想:设D是一个2-(v,κ,1)设计,G≤Aut(D).若G区本原,则G点本原.此猜想由Delandtsheer于1988年提出,不少学者己经证明在一些附加条件下它是成立的.本
花粉管的萌发和生长是有花植物成功完成双受精过程的必要条件,大量研究表明,有许多分子机制参与并调控这一过程的发生。本文以模式植物拟南芥为研究材料,通过观察分析了约350
线粒体是存在于真核细胞细胞质中的一种细胞器,它有一套类似于细胞核DNA的遗传物质,即线粒体DNA(mt DNA),可独立进行复制、转录以及翻译过程。mt DNA具有突变率高、非重组、
植物细胞存在五类钾离子转运蛋白,其中四类已经有相关的研究报道,但拟南芥AtKEA基因家族尚未有任何实验报道。拟南芥AtKEA基因家族包括6个基因。序列分析显示,AtKEA基因家族
自1972年中美恢复邦交,针灸开始走出国门三十六年来,以针灸为先导的中医药已遍及世界各地,这是历史上最大的中医药文化输出。上世纪末和本世纪初,美、加、英、澳、日等发达国
会议