BC膜应用于SD大鼠肌腱修复及GFP-BMSCs-BC组织工程化肌腱初步研究

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肌腱损伤是一种在运动和工作中常见的软组织损伤。对于肌腱的损伤治疗,较轻微的损伤主要是通过手术缝合或者是理疗进行恢复而肌腱受损由于并不拥有再生性,所以较严重肌腱受损不能够靠自体完全修复。肌腱损伤只能通过自体、异体的肌腱移植治疗,通常自体肌腱移植能恢复肌腱力学性能不超过原来性能的40%,有的出现大量的疤痕组织增生。对于异体肌腱移植,材料来源就少,移植后易发生体内排斥现象。在肌腱修复方面,采用生物材料做成人工肌腱替换,这种方法成为修复损伤肌腱的研究重点方向。细菌纤维素膜(Bacterial cellulose BC)是由微生物在适宜环境下,利用生长环境中的葡萄糖合成的纯度高,持水性大,抗拉伸能力强的天然纳米级纤维素。具有相当高的纯度和结晶度、生物相容性和生物降解性。本课题研究涉及修复大鼠的损伤肌腱实验,在实验过程中将BC膜作为人工肌腱替换物应用在修复大鼠损伤肌腱并进行初步组织工程化研究。本论文研究内容包括:第一部分研究,通过微生物发酵得到BC膜材料,并对其各种物化性能表征进行研究,实验结果表明BC膜在物化性能方面能够作为人工肌腱的替代品;第二部分研究结果验证BC膜不仅对实验细胞增殖生长毒性小,并且实验细胞可以很好地附着在BC膜上生长,BC膜具有良好的生物相容性;第三部分实验研究对BC膜在替代大鼠受损肌腱的过程中,进行实时跟踪观察。植入肌腱替代物恢复过程中,新生细胞的生长及其胶原蛋白的表达,证明了新生细胞确实能在BC膜上甚至膜内生长,还能在BC膜上分泌组成肌腱的主要胶原蛋白,这为损伤肌腱恢复提供了必要条件;第四部分研究是组织工程化初步研究。以骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells BMSCs)作为种子细胞,BC膜作为支架,用来替换大鼠的损伤肌腱,进行组织工程学研究实验。本研究的成果:证明了BC膜具有相当高的纯度、结晶度和持水性。在生物力学方面更优于天然肌腱,能够满足动物的运动受力和拉伸;以浸提液法证明了BC膜的细胞毒性为Ⅰ级,说明BC膜对细胞生长无毒性,符合生物材料安全要求;HE染色和免疫组化证明了新生肌腱细胞能够附着在植入的BC膜上并生长分泌胶原蛋白,修复损伤肌腱;组织工程化的初步研究说明了BC膜能够作为生物材料支架,使种子细胞能够在支架上生长并对受损的肌腱修复起到促进作用,为未来的肌腱损伤治疗带来了新的思路,或许可以在组织工程学进展中提供新的理论依据和技术手段。
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