炮制前后多花黄精水提物抗氧化活性成分的比较研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:anzhen0219
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多花黄精(Polygonatum cyrtonema Hua)为百合科(Liliaceae)黄精属(Polygonatum Mill.)植物,是一种常见的药食同源植物,可经黄酒“九蒸九制”炮制。目前,对于多花黄精炮制前后药理活性和成分的差异性比较,多集中于醇提物成分,而缺乏水提物相关活性成分的比较研究。因此,本论文以“炮制前后的多花黄精水提物”(以下简称为“炮制前后水提物”)为切入点,比较了其抗氧化活性与相关成分的变化。本论文,首先将炮制前后的多花黄精粉末,经热水浸提获得炮制前后的水提物,比较其体外抗氧化活性,发现“九蒸九制”后水提物总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)和2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl(DPPH)自由基清除能力,均得到显著性提高。此后,将炮制前后的水提物,经醇沉,取上清液再经离心、浓缩、干燥以获得到脂溶性组分,取醇沉物再经除蛋白、透析、干燥以得到多糖组分。通过测定T-AOC和DPPH等指标,发现炮制后水提物脂溶性组分和多糖组分抗氧化活性,均显著高于炮制前。对于脂溶性组分,利用优化后的HPLC分析条件:色谱柱ZORBAX SB-C18(5μm,4.6×250 mm)、进样20μL、波长203 nm、柱温30℃、流速1.0 m L/min;流动相水和乙腈梯度洗脱;再经HPLC-ESI-MS/MS技术,鉴别了20种化合物。Guanosine和L-Tryptophan炮制后含量显著降低,Adenosine、Cyclo dileucyl(or isoleucyl)、Polygonatine B、4-(1-methyl-dodecyl)-benzene Sulfonic acid和Linoleic acid在炮制后含量显著升高。对于多糖组分,通过HPGPC法对炮制前后的分子量进行探究,发现炮制前多糖(PCPC)为均一对称峰,分子量4842 Da;炮制后多糖(PCPW)为三个重叠峰,分子量分为1.69×107Da、7.96×106Da和3.39×106Da。单糖组成分析显示,PCPC主要为果糖(93.57%),另含有葡萄糖(6.43%);PCPW主要也是果糖(95.35%),另含有则葡萄糖(3.00%)、鼠李糖(0.50%)、半乳糖(0.05%)、甘露糖(0.83%)、半乳糖醛酸(0.15%)和葡萄糖醛酸(0.14%)。进一步,DEAE cellulose-52色谱柱分析表明,PCPC主要含由蒸馏水洗脱的中性多糖PCPC-1;PCPW既含由蒸馏水洗脱的中性多糖PCPW-1,也含有不同浓度氯化钠溶液洗脱的酸性多糖PCPW-2~PCPW-7。总之,本论文发现,炮制后水提物抗氧化活性显著提升。这一提升,可能与炮制前后脂溶性组分和多糖组分成分的显著变化相关。
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