p53蛋白主要位于细胞核浆,能与DNA特异性的结合,其活性受到磷酸化、乙酰化、甲基化、泛素化等翻译后修饰调控。由于被泛素化降解,在生理条件下,细胞内的p53蛋白会维持在一个较低的水平,在应激条件下,由于泛素化降解过程受到抑制,p53蛋白表达量会被上调。p53基因是DNA损伤应答(DDR)中的一个关键因素,p53的调节在该过程中起着关键作用。蛋白在细胞内的泛素化降解是一个严格调控的可逆过程,其中去泛素化酶的调节就是其中的一个重要的环节。细胞内广泛存在着许多去泛素化酶(DUBs)可以水解底物蛋白上的泛素链之间的连接,从而达到去泛素化的作用,对蛋白降解进行反向调节,进而影响蛋白质的功能。我们首先使用双荧光素酶报告基因检测方法对多种去泛素化酶进行筛选,发现过表达USP49可以显著激活DNA损伤反应信号通路。进一步检测该信号通路中p53的mRNA水平,发现过表达USP49可以提高p53的mRNA水平。通过实验发现USP49与p53蛋白的N末端相互作用并抑制p53的泛素化的几种类型。此外,过表USP49发现HCT116细胞对Etoposide介导的DNA损伤反应更敏感。除此之外,p53也能调节USP49的表达,在USP49敲除的基因小鼠中用AOM/DSS更易导致肿瘤的形成。