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目的:本研究采用大鼠VSMCs作为毒性研究的评价模型,观察原花青素对PM2.5诱导的VSMCs产生过度增殖及迁移的潜在保护作用。方法:选取健康的体重在100-120g的雄性SD大鼠,在无菌环境下分离其胸腹主动脉,采用组织贴块法培养原代VSMCs。本实验共分为5组,分别为对照组、PM2.5组(终浓度为100μg/m L)和低、中、高原花青素干预组(终浓度分别为5μmol/m L、10μmol/m L和20μmol/m L)。采用ROS荧光探针DCFH-DA检测各组细胞的ROS荧光强度;用CCK-8试剂盒和Ed U细胞增殖试剂盒检测各组细胞的增殖情况;用Transwell小室和细胞划痕实验检测各组细胞的迁移情况;采用Western blot法检测VSMCs中MMP9、PCNA、Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK3β和β-actin的蛋白水平;用RT-PCR法检测MMP9、PCNA和β-actin m RNA水平。结果:1.与对照组相比,PM2.5组ROS荧光强度明显增强;与PM2.5组相比,原花青素干预组ROS荧光强度明显减弱。2.根据CCK-8试剂盒和Ed U细胞增殖试剂盒结果显示,与对照组相比,PM2.5组细胞增殖明显增多;与PM2.5组相比,原花青素干预组细胞增殖明显减少。3.根据Transwell小室及细胞划痕实验结果显示,无论从纵向或横向来看,与对照组相比,PM2.5组细胞迁移数量及迁移距离显著增加;与PM2.5组相比,原花青素干预组细胞迁移数量及迁移距离显著减少。4.增殖及迁移终指标PCNA及MMP9蛋白及m RNA水平的变化:与对照组相比,PM2.5组PCNA及MMP9表达水平均显著上升;与PM2.5组相比,原花青素干预组PCNA及MMP9表达水平均明显下降。5.PM2.5可以激活PI3K/Akt信号通路,使Akt出现磷酸化,上调p-Akt水平,p-Akt的上调可以负调控GSK-3β的磷酸化,p-GSK3β水平下降;加入原花青素干预后,p-Akt的水平下调,p-GSK3β的水平上调,差异均有统计学意义(P<0.05)结论:原花青素对PM2.5诱导的VSMCs产生的过度增殖及迁移有潜在的保护作用,其保护机制可能与原花青素介导PM2.5激活的PI3K/Akt信号通路有关。