论文部分内容阅读
随着规模化养猪业发展,猪人工授精技术的普及面不断扩大,而精液保存质量的优劣决定生产效率高低,其中稀释剂发挥着至关重要的作用。精液常温保存过程中需要进行稀释,会减弱精液原有抗氧化作用,使过多活性氧无法及时清除,质膜易受被损伤,导致精子质量下降。同时,微生物的存在也会影响精液保存质量。为同时解决抗菌和抗氧化的问题,本研究在稀释液中添加原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)和乳酸链球菌素(Nisin),检测精液保存质量、渗透压、总抗氧化能力、丙二醛含量、酸性磷酸酶活性和抑菌效果等,以期为OPC和Nisin在精液稀释液中的联合添加提供一些理论参考。本研究主要获得以下结果:1.猪精液稀释液中添加不同浓度(10、20、30、40、50、60、70μg/mL)OPC溶液,可优化精液保存效果。其中,稀释液中添加50μg/mL OPC效果最好,常温保存第5d的精子活率61.63%、质膜完整率41.88%、顶体完整率75.88%,显著高于对照组(P<0.05)。常温保存第5d时精子T-AOC为1.43 U/mL,高于对照组,二者差异不显著(P>0.05);MDA含量为2.37 nmol/mL,显著低于对照组(P<0.05)。另外,稀释液中添加OPC对稀释液渗透压无显著影响(P>0.05)。2.稀释液中添加不同浓度(10、20、30、40、50μg/mL)Nisin到稀释液中,能够在提高精液保存质量同时抑制细菌繁殖。添加40μg/mL Nisin组的常温保存效果最好,保存到第5d精子活率能达到60.12%,精子质膜完整率为44.98%,顶体完整率为71.78%,显著高于对照组(P<0.05)。稀释液中添加30μg/mL Nisin抑制金黄色葡萄球菌效果显著优于庆大霉素(P<0.05),抑制鲁菲不动杆菌效果与乳酸链球菌素相当(P>0.05);稀释液中添加40μg/mL Nisin抑制大肠杆菌效果显著低于庆大霉素(P<0.05)。3.猪精液稀释液中联合添加50μg/mL OPC和20μg/mL Nisin的常温保存效果优于单独添加两种物质组和对照组(P<0.05),常温保存到第5 d精子活率为62.07%,精子质膜、顶体完整率分别为56.00%和78.64%,精子线粒体活性为60.46%。第5 dOPC:Nisin=50:20组精子T-AOC为1.32 U/mL,酸性磷酸酶活性为573.34 U/L,均显著高于对照组和单独添加药物组(P<0.05);MDA含量最少,为2.36 nmol/mL,显著低于其余各组(P<0.05)。4.稀释液中添加OPC-Nisin可显著抑制金黄色葡萄球菌生长(P<0.05),且作用效果优于庆大霉素,但对大肠杆菌和鲁菲不动杆菌的抑制效果欠佳(P>0.05)。综上所述,添加原花青素和乳酸链球菌素能提高精液保存质量并延长保存时间。原花青素最适添加浓度为50μg/mL,乳酸链球菌素最适添加浓度为40μg/mL,联合添加最适浓度为50μg/mL原花青素和20μg/mL乳酸链球菌素。