目的探索A2B5⁺/CD133^-与CD133⁺/A2B5^-胶质瘤干细胞球的表型特点及其移植瘤病理，明确两类胶质瘤干细胞（GSCs）生物学特性的异同。方法使用神经干细胞培养基（NSCM）培养人脑胶质瘤细胞SHG-139及SHG-44，获取其胶质瘤干细胞球，二次球体形成试验验证自我更新能力；纯化培养后行细胞免疫（ICC）荧光染色检测其CD133、A2B5、Nestin、Vimentin、VEGFR-2、IDH1^R132H、 NG2表达情况；含血清培养基诱导其分化，行ICC检测其GFAP，β-IIITubulin，GalC表达情况，验证多向分化能力；表达谱基因芯片明确SHG-139胶质瘤干细胞球及其分化细胞的差异表达基因及关键通路；建立两类胶质瘤干细胞球的裸鼠颅内原位移植瘤模型，免疫组织化学检测CD133、A2B5、Nestin、GFAP、S-100、VEGFR-2、CD31、CD34表达情况，对照分析两类原位移植瘤的病理特点。结果使用神经干细胞培养法成功获取SHG-139与SHG-44的胶质瘤干细胞球，分别命名为SHG-139s及SHG-44s；二次球体形成试验验证两者都具有自我更新能力；ICC染色证实SHG-139s表达A2B5⁺/CD133^-，SHG-44s表达CD133⁺/A2B5^-，两者均表达Nestin阳性，而两者表达Vimentin、VEGFR-2、IDH1^R132H、NG2存在差异。含血清培养基诱导分化后，ICC证实两类GSCs均具有多向分化能力，而分化后的SHG-139s表达少枝胶质细胞标记物GalC高于分化后的SHG-44s，后者表达神经元早期标记物β-III Tubulin高于前者；基因芯片明确SHG-139s及其分化细胞的差异表达基因与干性维持及侵袭能力密切相关，MAPK通路、TGF-beta通路及细胞粘附功能相关通路为关键差异通路；成功建立了两类细胞的原位移植瘤模型，发现SHG-139s原位移植瘤含有少枝胶质细胞瘤成分，而SHG-44s原位移植瘤未发现该类病理改变；免疫组化提示两者均表达GFAP，S-100阳性；而GSCs标记物在移植瘤内表达低，SHG-139s移植瘤中A2B5+肿瘤细胞具有侵袭能力；SHG-44s颅内原位移植瘤较SHG-44的颅内原位移植瘤表现出更强的局部浸润能力；SHG-44s移植瘤中发现特异性抗人CD34阳性的围成管状的胶质瘤细胞，而SHG-139s未发现该类细胞。结论A2B5⁺/CD133^-与CD133⁺/A2B5^-胶质瘤干细胞球均具备胶质瘤干细胞自我更新、多向分化及高致瘤性等特点，然而在分子表型特点、分化倾向及移植瘤病理上两者体现出不同的生物学特性，本实验从胶质瘤干细胞的角度揭示了胶质瘤的异质性特点；使用基因芯片技术结合生物信息学分析明确了A2B5⁺/CD133^-的GSCs干性维持及侵袭能力的关键基因及通路，为进一步研究靶向该类GSCs的治疗提供了实验依据。