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目的探讨RASSF1A基因甲基化在肝癌细胞株中表达情况及5-Aza-Cd R对人肝癌细胞株Hep G2细胞增殖及RASSF1A基因m RNA表达的影响。方法体外培养肝癌细胞株及正常肝细胞株,应用MSP法分别检测3种肝癌细胞株Hep G2、Hep3B、SK-HEP1及正常肝细胞株LO2 RASSF1A甲基化水平,以探讨RASSF1A甲基化在肝癌细胞株的表达情况。以肝癌细胞株Hep G2为研究对象,实验组分别以不同浓度的甲基化抑制剂5-Aza-Cd R(0.5μmol/L、5μmol/L、50μmol/L)对人肝癌细胞株Hep G2去甲基化组处理,对照组5-Aza-Cd R浓度为0μmol/L;采用CCK-8法检测两组肝癌细胞增殖情况的变化,以观察甲基化抑制剂对肝癌细胞增值的影响,并采用RT-PCR检测5-Aza-Cd R处理前、后Hep G2细胞抑癌基因RASSF1A基因m RNA表达水平的变化。结果人肝癌细胞株Hep G2、Hep3B、SK-HEP1均检测到RASSF1A基因甲基化表达,而正常肝细胞株LO2中未检测到RASSF1A基因的甲基化表达,提示肝细胞癌变与RASSF1A基因甲基化有关。5-Aza-Cd R可以抑制肝癌细胞Hep G2的生长增值。处理72小时后,抑制率最明显,且随着药物浓度增加,增殖抑制率越明显,表明去甲基化可以抑制细胞生长增值(F=44.164,P<0.01)。5-Aza-Cd R处理后实验组较对照组RASSF1A基因m RNA表达明显上调,呈剂量依赖性。在50μmol/L时去甲基化效果最明显。50μmol/L 5-Aza-Cd R处理24h、48h、72h时RASSF1A基因m RNA相对表达量分别为(0.2798±0.0048、0.3678±0.0161、0.3873±0.00105),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),表明去甲基化后可以增加Hep G2细胞RASSF1A基因m RNA表达。结论1.肝细胞癌变与抑癌基因RASSF1A甲基化有关。2.5-Aza-CdR可以抑制HepG2细胞生长增殖,呈剂量依赖性,其机制可能与其调控RASSF1A基因启动子甲基化水平,从而使RASSF1A基因m RNA表达上调有关。